让CHO远离污染,默克推出基因编辑新工具

【字体: 时间:2016年09月13日 来源:生物通

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  为此,默克推出了一项全新的基因编辑技术,用于对CHO细胞系进行改造,从而抵御MVM病毒。这项Centinel™ 技术让制药商可以通过另外一种途经来降低 MVM 污染物带来的风险,同时维持原有的蛋白质品质和细胞系生产力。

生物制药过程中的污染是一个罕见但灾难性的事件,每次污染的清理费用就高达数百万美元,这还不包括产品收入的损失。而患者受到的影响最大,因为他们若使用了被污染的生物制品是很危险的。

大家都知道,CHO细胞通常用于生物制品的生产。然而,尽管人们已大力采用化学成分明确、无动物成分的制造工艺,但是CHO细胞仍有可能受到小鼠细小病毒(MVM)的污染。

为此,默克推出了一项全新的基因编辑技术,用于对CHO细胞系进行改造,从而抵御MVM病毒。这项Centinel™ 技术让制药商可以通过另外一种途经来降低 MVM 污染物带来的风险,同时维持原有的蛋白质品质和细胞系生产力。

Centinel™ 技术是如何实现的呢?这要从病毒的感染过程说起。与细胞表面受体相结合是许多病毒感染过程中关键的一步。2006年,一篇发表于JBC上的论文证实,来源于MVM的病毒衣壳与带有末端唾液酸的特定多糖相结合。SLC35A1产生的蛋白质负责将唾液酸运输到高尔基体。敲除这个基因,可避免MVM结合并进入细胞。

于是,默克利用旗下Sigma-Aldrich的锌指核酸酶(ZFN)试剂,来靶定SLC35A1。ZFN是一类经过编辑的DNA结合蛋白,它可以在用户指定的位置创建DNA双链断裂,从而实现基因组的靶向编辑。通过这种方法,CHO细胞中的SLC35A1被敲除。

之后,研究人员对结果进行了验证。他们将野生型和SLC35A1敲除后的细胞暴露在MVM中。野生型细胞立即观察到活力丧失和增殖停止;然而,SLC35A1敲除细胞却没有受到MVM的影响。这些结果表明,野生型细胞容易受到感染,而SLC35A1敲除细胞耐受。同时,SLC35A1敲除后,细胞系生产力和蛋白质品质没有受到不良影响。

目前,默克提供CompoZr® Knockout ZFN Kit - CHO SLC35A1,可对CHO细胞系进行改造,使其能够抵御MVM病毒。除了购买ZFN试剂,客户也可以委托CHOZN团队来改造CHO细胞系。此外,BioReliance® 检测服务可验证对 MVM 的抵御能力,证明这种病毒无法在细胞系中繁殖。

默克生命科学业务部的首席执行官Udit Batr表示:“我们一直坚持将多年来在工艺开发、生物制品生产和基因编辑工具上积累起的深厚专长和良好信誉加以充分运用,提升对客户及其患者的安全保障,Centinel ™ 技术的问世只是其中的一个缩影。我们还将经验和技术有效结合,攻克业内一些最复杂的挑战并满足细胞疗法等前景广阔的应用的需求。”(生物通 余亮)

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