Cellartis®干细胞研究用系列产品介绍之

不依赖LIF的小鼠胚胎干细胞培养基:GS2-M

【字体: 时间:2017年01月13日 来源:Takara

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  Cellartis 提供一款小鼠胚胎干细胞培养基GS2‐M,其成分确定、无血清,支持无饲养层培养,通过添加两种特别的小分子抑制剂(CHIR99021,PD0325901=2i)来阻断分化信号通路GSK3β和 ERK/MEK,进而维持小鼠胚胎干细胞处于Ground state。

小鼠胚胎干细胞是首个被体外分离培养并建系的干细胞,目前其相关研究已经比较完善并投入到了实际应用中,很多其他种属的干细胞研究也都会参考小鼠胚胎干细胞的研究成果。一个好的小鼠胚胎干细胞体外培养体系,需要同时满足操作简便、结果稳定、增长迅速、可重复性好、有效维持胚胎干细胞处于Ground-state等特点。

Cellartis 提供一款小鼠胚胎干细胞培养基GS2‐M,其成分确定、无血清,支持无饲养层培养,通过添加两种特别的小分子抑制剂(CHIR99021,PD0325901=2i)来阻断分化信号通路GSK3β和 ERK/MEK,进而维持小鼠胚胎干细胞处于Ground state。值得一提的是,使用GS2-M培养基培养的小鼠胚胎干细胞,与添加血清和LIF的培养基培养相比,可以更好地维持小鼠胚胎干细胞处于Ground-state。

1. GS2-M培养基特点与优势

2. GS2-M利于维持小鼠胚胎干细胞处于Ground-state

Ground state标志基因Rex1和下游绿色荧光蛋白质基因GFP插入的小鼠胚胎干细胞株(Rex1GFPd2),分别使用GS2-M培养基和添加血清&LIF培养基(10%FBS/GMEM+LIF)培养3代,通过流式细胞仪检测并分析Rex1-GFP表达情况,如下图所示,不添加LIF的GS2-M培养基培养的小鼠胚胎干细胞阳性率高于70%,更有利于维持小鼠胚胎干细胞处于Ground-state(参考文献:Nat. Cell Biol. (2011) 13, 838-845)。

3. GS2-M培养的小鼠干细胞可以高效制备嵌合体小鼠

来源于黑色毛小鼠的胚胎干细胞使用GS2-M培养基培养1周后,注射入白色毛小鼠囊胚,根据毛色可以判断嵌合体小鼠的效率,如下图所示,新生小鼠呈现100%黑色毛,证实GS2-M可以高效制备嵌合体小鼠(本数据由新潟大学脑研究所的崎村建司先生和阿部学先生提供)。

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