一条引物敲除一个基因——英茂盛业E.coli Cas9基因编辑试剂盒

【字体: 时间:2017年01月10日 来源:英茂盛业

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  北京英茂盛业研发的E. coli. Cas9基因编辑试剂盒基于CRISPR/Cas9基因编辑技术,可以高效实现大肠杆菌的基因敲除、敲入、突变以及多种突变体构建等各种基因编辑方式。并且基因编辑后不留痕迹和抗性基因,菌种可以很方便地进行下一轮基因编辑。

CRISPR/Cas9基因编辑技术为研究人员提供了便利的基因编辑工具。CRISPR/Cas9基因编辑技术可以对动物、植物、微生物等各种生物基因组进行定点编辑。

大肠杆菌是最重要的模式生物之一,在基因克隆、蛋白表达、酶进化研究及各种生理生化功能研究中均发挥重要作用。CRISPR/Cas9基因编辑技术的出现使得研究人员可以快速便捷地对大肠杆菌的基因组进行改造,满足研究需要。

北京英茂盛业研发的E. coli. Cas9基因编辑试剂盒基于CRISPR/Cas9基因编辑技术,可以高效实现大肠杆菌的基因敲除、敲入、突变以及多种突变体构建等各种基因编辑方式。并且基因编辑后不留痕迹和抗性基因,菌种可以很方便地进行下一轮基因编辑。

试剂盒中配备了实验所需的酶和试剂。使用时,用户仅需合成一条sgRNA靶点引物即可完成基因编辑,非常便捷。整个实验周期进行1周左右。而且原靶点sgRNA表达质粒清除后可以快速开始新一轮的基因编辑。

产品特点:

▪ 无痕基因编辑,不残留抗性基因
▪ 设计灵活,敲入、敲除、突变均可实现
▪ 一次可以表达1~4个sgRNA靶点,多位点同时编辑
▪ 新一轮基因编辑仅需3天

实验流程:

产品应用:

单点切割,基因删除:


 
单点切割,基因插入/突变:


 
双点切割,基因插入/突变:


 
双点切割,基因删除:


 
多点切割,同时编辑多个基因:

单点切割,同时构建多个突变体:

使用案例:

采用E. coli. Cas9基因编辑试剂盒敲除大肠杆菌BL21菌种中的lacZ基因。

原理:β-半乳糖苷酶基因(lacZ)是大肠杆菌乳糖代谢途径中的一个酶。β-半乳糖苷酶可以将无色化合物X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)切割成半乳糖和深蓝色的物质5-溴-4-靛蓝。这个反应被广泛用于基因工程中蓝白斑筛选鉴定重组质粒。通过CRISPR/Cas9编辑β-半乳糖苷酶基因,造成β-半乳糖苷酶基因功能缺失,编辑后的BL21菌种将不能代谢X-gal产生蓝斑。

实验结果:


 
Xgal平板显色检测结果:①为实验组,同时转入lacZ靶点sgRNA表达载体和修复片段。②为对照组,转入阴性对照sgRNA表达载体和修复片段。

更多详细信息请访问:
http://www.inovogen.com/geneknockout/CRISPR-Cas9/CRISPR_Cas9chanpin/EcoliC/

立即索取大肠杆菌Cas9基因编辑试剂盒的详细资料

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