四川省人民医院崔凡组： MiR-181a在调节人瘢痕瘤成纤维细胞增殖和凋亡中的作用

　　

瘢痕疙瘩是良性皮肤肿瘤，其特征为成纤维细胞的组织学蓄积以及由于皮肤损伤后异常伤口愈合过程而产生的细胞外基质（ECM）组分的过度沉积。虽然瘢痕疙瘩是良性皮肤肿瘤，但其管理仍然是一个过度具有挑战性的临床问题。miRNA作为转录后基因阻遏物，是导致皮肤疾病的多种病理生理过程的参与者。有研究表明瘢痕疙瘩组织中miR-181a的量显著增加。然而，miR-181a和相关信号通路在人瘢痕疙瘩成纤维细胞发病机理中的功能作用仍有待验证。

在这项研究中，四川省人民医院、电子科技大学的崔凡副教授研究团队取瘢痕疙瘩患者胸部、耳垂、肩部和大腿的瘢痕疙瘩组织和正常皮肤组织样品20个为材料，通过miRNA芯片技术分析以比较瘢痕疙瘩和正常皮肤组织之间的miRNA表达谱，利用定量实时PCR评估miR-181a表达水平，利用细胞计数试剂盒-8（CCK-8）和5-乙炔基-2-脱氧尿苷（EdU）测定法测定细胞增殖，并用流式细胞术检测细胞周期和凋亡，使用荧光素酶报告基因测定法鉴定miR-181a的直接靶标。

本研究拟通过以上实验，探讨miR-181a在人瘢痕疙瘩发育中的精确功能和潜在的机制。在本研究中，跟正常皮肤组织相比，miR-181a在人瘢痕疙瘩组织及成纤维细胞中显著上调。miR-181a的过表达增强了瘢痕疙瘩卵母细胞DNA的合成和增殖并起到了抑制凋亡的作用；而抑制miR-181a的表达则会引发相反的效应。此外，miR-181a通过与其靶基因3'UTR区域的直接相互作用抑制了PH结构域富含亮氨酸重复蛋白磷酸酶2（PHLPP2）的表达，随后增强了AKT活化。在没有抑制的条件下，PHLPP2的过表达减弱了miR-181a对瘢痕疙瘩成纤维细胞中细胞增殖和凋亡的影响。最后，研究还发现miR-181a的模拟物具有增加正常皮肤成纤维细胞增殖的功能。

 
图 miR-181a在人瘢痕疙瘩组织和成纤维细胞中的表达增加

本研究证明miR-181a在人瘢痕疙瘩成纤维细胞发育中具有促进细胞增殖和抑制凋亡的作用。如上述实验结果所示，抑制miR-181a表达可显著地消除人瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖能力并诱导凋亡。

本研究中microRNA微流体芯片技术由联川生物协助完成。

用户文章
Rang Z，et al.(2016) MiR-181a Targets PHLPP2 to Augment AKT Signaling and Regulate Proliferation and Apoptosis in Human Keloid Fibroblasts. Cellular Physiology and Biochemistry. DOI: 10.1159/00045313

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