复旦大学生科院学者Cell子刊获miRNA产生途径研究新进展

　　

复旦大学生科院的研究人员发表了题为“The Protein Phosphatase 4 and SMEK1 Complex Dephosphorylates HYL1 to Promote miRNA Biogenesis by Antagonizing the MAPK Cascade in Arabidopsis”的文章，取得了植物miRNA加工领域的突破性进展：鉴定了磷酸酶复合物PP4/SMEK1通过拮抗MAPK的激酶活性直接介导了HYL1的去磷酸化，最终保证植物体内正常的miRNA产生。

这一研究成果公布在6月5日的Developmental Cell杂志上，文章的通讯作者是复旦大学郑丙莲研究员，她长期从事植物小RNA的功能和作用机制研究。自从2012年加盟复旦生科院以来，她实验室在植物小非编码RNA领域取得了多项重要研究成果，已在PLoS Genetics和Developmental Cell等高水平生物学综合期刊发表多篇重要研究论文。其中2016年发表的关于套索RNA的研究成果在非编码RNA研究领域实属重要的原创性发现。文章第一作者为苏传斌。

miRNA参与生物众多的发育生物学过程，已知具有颈环结构的初级miRNA转录本需要经过Dicer复合物的连续两次切割产生成熟的miRNA。尽管miRNA产生途径的基本框架已经了解得非常清楚，但关于Dicer复合物本身的组装和调控机制仍不清楚。近年来发现动物中Dicer复合物的关键互作因子TRBP的功能发挥需要MAPK介导的磷酸化调控，而植物中TRBP的同源蛋白HYL1的功能发挥则需要CPL1/2介导的去磷酸化调控。同时HYL1被证明是一个不稳定的蛋白。那么，是否HYL1的磷酸化与其蛋白稳定性相关以及TRBP/HYL1磷酸化调控的精确机制是什么呢？

该论文的第一作者、2012级的硕博连读研究生苏传斌同学通过正向遗传学的手段鉴定了磷酸酶复合物PP4/SMEK1通过拮抗MAPK的激酶活性直接介导了HYL1的去磷酸化，最终保证植物体内正常的miRNA产生。作者首先发现smek1突变体表现出全基因组水平的miRNA含量下降，进一步研究证明SMEK1与HYL1蛋白互作并直接稳定HYL1。

同时作者首次证明植物体内SMEK1可以作为PP2A家族的磷酸酶PP4的调节亚基，组装成功能性的PP4复合物，并证明HYL1就是PP4/SMEK1的底物。此外，作者进一步通过生化和遗传学手段证明植物的SMEK1能够抑制MAPK的激酶活性，并且促进HYL1的去磷酸化从而保证功能性/去磷酸化HYL1蛋白的累积。

最后作者证明不同于磷酸酶CPL1/2可能在特定的发育阶段调节HYL1的去磷酸化，PP4/SMEK1可能通过整合环境因素参与了miRNA加工过程的调控，因为SMEK1蛋白本身受到脱落酸ABA的显著诱导。这项研究首次在激酶MAPK和磷酸酶PP4/SMEK1之间建立了联系，为深入研究植物miRNA的加工奠定了坚实基础。同时，鉴于PP4/SMEK1复合物在动植物中的高度保守性，这项研究为揭示动物中TRBP的磷酸酶提供了重要的线索。

图注：模式植物拟南芥中miRNA加工的关键组分HYL1受到磷酸化的调控。CPL1/2可能整合发育信号将HYL1去磷酸化，而PP4/SMEK1则感应环境变化通过拮抗MAPK通路维持HYL1的去磷酸化从而促进miRNA加工。

原文标题：

The Protein Phosphatase 4 and SMEK1 Complex Dephosphorylates HYL1 to Promote miRNA Biogenesis by Antagonizing the MAPK Cascade in Arabidopsis