Taq酶中的“超级英雄”

【字体: www.ebiotrade.com 时间:2017年9月27日 来源:默克中国

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  KAPA Biosystems专有的直接分子进化平台是一种高度可定制的蛋白质工程技术,能够产生并筛选大量的酶突变体。野生型DNA聚合酶基因经过多轮的突变、筛选和扩增,最终获得需要的优异特性,它们是Taq酶中的“超级英雄”。

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从1983年Kary Mullis提出聚合酶连锁反应方法至今已超过30年,PCR反应在实验室中获得了指数级别的发展,为分子生物学带来革命性的推进,并且这个革命仍在继续爆发,丝毫没有放缓的迹象。随着PCR应用越来越多样化,意味着研究者对于Taq酶功能的需求也越来越多样化,一“酶”走天下的时代已一去不返。

当下分子生物学试剂市场基本上都是野生型的DNA聚合酶。随着客户实验要求的提升和生物样本复杂性的提高,野生型DNA聚合酶的局限性在许多实验中也逐渐凸显出来,如扩增效率低、特异性差、高AT或GC含量样本扩增结果差、样本中或PCR系统中的有些抑制剂对反应有干扰等。

KAPA Biosystems专有的直接分子进化平台是一种高度可定制的蛋白质工程技术,能够产生并筛选大量的酶突变体。野生型DNA聚合酶基因经过多轮的突变、筛选和扩增,最终获得需要的优异特性,它们是Taq酶中的“超级英雄”:

▪  对于模板中含有常见的PCR反应抑制物如粪便样品等,KAPA2G Robust DNA聚合酶强健的合成力可以获得更稳定的结果。
▪  对PCR速度有高要求的话,KAPA2G Fast DNA聚合酶延伸速度高达1s/kb,并且具有高灵敏度、高特异性的特性。较传统PCR反应可以节省大约75%的时间。
▪  如果对qPCR实验的灵敏度和速度有要求,KAPA SYBR FAST qPCR KITS中的Taq酶提高了对荧光染料的耐受性,可大大提高信号强度及反应的有效性。

下面就让我们见识一下这些“超级英雄”的真正实力吧!

【快如一道闪电】

KAPA2G Fast DNA 聚合酶

通过野生型Taq酶改造的第二代工程酶,具有更高的合成能力和合成速度。
▪  反应更快:PCR反应时间缩短75%。
▪  合成能力更强:延伸时间缩短至1 sec/kb。
▪  兼容更广:兼容多种实验样本,甚至富含AT-和GC-的样本。
▪  灵敏度及产量更高

KAPA2G快速DNA聚合酶应用方案:小鼠基因型快速鉴定

KAPA2G快速DNA聚合酶每秒钟扩增1kb的超凡速度可以在各个研究领域中发光发热,例如用于小鼠基因型快速鉴定:


 
快速的样本抽提+最快速KAPA2G DNA聚合酶,从样本到结果,轻松实现1小时鉴定小鼠基因型!

KAPA2G快速DNA聚合酶扩展阅读:

Stopped-flow DNA polymerase assay by continuous monitoring of dNTP incorporation by fluorescence

▪  停流DNA聚合酶反应(Stopped-flow DNA polymerase assay)通过荧光染料实时监测dNTP的插入情况,证明KAPA2G快速DNA聚合酶是目前市场上最快速的聚合酶!
▪  KAPA2G快速DNA聚合酶配合硬件实现的近瞬时加热冷却,三分钟完成30个循环PCR反应,难以想象的快捷!

【强健看得见】

做过多年实验的你已经深深体会到实验就像人生一样总是无法完美:

▪  做了很多努力,DNA模板仍然无法完全去除抑制成分
▪  模板序列GC或AT含量过高,你无法控制
▪  不同来源、不同GC含量的多个DNA模板无法使用相同的PCR方案

但就如人生需要低头奋力前行,实验也需要不懈努力,还好有强健的KAPA2G Robust DNA聚合酶帮你分担,共同克服这些PCR实验条件的不完美。

KAPA2G Robust DNA聚合酶

基于野生型Taq酶进化改造的第二代工程酶,用于解决广泛扩增子类型(富含GC或AT)不一致的扩增问题。适合于挑战性的PCR应用和困难样本的扩增,显著降低尝试多种酶带来的高消费和不断优化扩增方案浪费的时间。

▪  合成能力强:耐受PCR体系中的抑制成分,兼容多种实验样本。优化粗制样本、FFPE样本、富含AT-和GC-样本、菌落PCR反应。
▪  延伸速度比野生型Taq酶更快:延伸时间缩短至15-30 sec/Kb,帮助实验者更快的获得结果。
▪  灵敏度和产量更高:对于样本量有限或模板含量低的实验尤其适用。

 

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工欲善其事,必先利其器。科学研究亦是如此,好的工具可以帮助实验事半功倍,化繁为简,争分夺秒!

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