新一代的胰蛋白酶：更特异、更稳定

对于细胞培养实验室而言，胰蛋白酶（trypsin）是一种必备的工具。尽管风靡实验室五十年，但胰蛋白酶并非完美。于是，默克集团的一些科学家对胰蛋白酶进行了改造，推出了一系列新品。

在许多脊椎动物中，胰蛋白酶作为消化酶而起作用。早在1876年，德国生理学家Wilhelm Kühne就发现了胰蛋白酶。它的前体胰蛋白酶原在胰脏中合成后，通过胰管被输送到十二指肠，并切割成活性形式。这种活性酶的隔离是为了防止体内的蛋白质被胡乱切割，导致胰腺炎等炎症。

胰蛋白酶的这种消化作用也使其成为一种强大的工具，能够在科学家手中实现精确的蛋白水解。胰蛋白酶在细胞培养中的应用于50多年前首次报道。胰蛋白酶的短暂孵育能够切割蛋白质，将贴壁细胞从各种培养表面上分离，并产生单细胞悬液，用于细胞计数、传代或下游实验。

除了细胞培养，胰蛋白酶在生命科学研究中还有其他用途。比如，在蛋白质组学实验中，它可以将蛋白质消化成肽段，用于质谱分析。胰蛋白酶的特异性在这里起了关键作用，因为它只分解精氨酸或赖氨酸残基上的羰基。

当然，胰蛋白酶出色的消化能力有时也会带来一些问题。这种酶可能连自己都不放过！MilliporeSigma的首席科学家Tracy Adair-Kirk说：“如果没有努力稳定它，胰蛋白酶最终会消化自己。”对于蛋白质组研究而言，这种自溶可能污染和混淆实验结果。

于是，MilliporeSigma的科学家开发出一种名为SOLu-trypsin的重组胰蛋白酶配方，供蛋白质组学研究使用。这种配方条件的改变意味着SOLu-trypsin不能自我切割，因而不会在质谱分析中带来污染峰。这对蛋白质组研究而言无疑是个好消息。

同样，在细胞培养应用中，胰蛋白酶也并非完美。传统的胰蛋白酶溶液在较高温度下会自身消化导致酶活性降低，最终影响细胞分离的效果，因此传统胰蛋白酶溶液必须冻存在-20°C，使用前须解冻。

为此，科学家们开始寻找一种在冰箱外也能够保持稳定的配方。幸运的是，他们真的找到了。新配方不仅在4℃和室温下保持稳定，即使在37℃，它也能保持90%以上的酶活。这种称为StableCell™的胰蛋白酶溶液以三种浓度提供，以适应不同的细胞粘性。

StableCell™胰蛋白酶溶液已被证实可用于多种细胞类型，比如SKOV-3、DU145、HEK293、HL-1、16HBE41o-和MDCK细胞系等，并与标准的胰蛋白酶表现出同样出色的性能。（生物通 薄荷）