如何选购凝胶成像系统，专家教你三招[选购宝典]

跑了一块漂亮的胶，这当然是件值得高兴的事，但还不够，您需要一台凝胶成像系统，来帮助分析凝胶所包含的信息。于是，凝胶成像系统应运而生。如何选择一台功（jing）能（ji）强（shi）大（hui）的凝胶成像系统，让我们听听专家的建议。

在被问到凝胶或印迹成像系统的关键功能时，Bio-Rad的资深科学家Kevin McDonald列出了三条：自动成像；应用灵活；一致性好，如果需要定量的话。其他的专家基本同意McDonald的观点，并补充了一些。结合这些专家的建议和实验室的需求，相信您一定能买到一台称心如意的系统。

操作更轻松

McDonald认为，有了自动化成像，“即使是新手或非专家的用户，也能获得高质量的图像。”如今，凝胶成像的用户群不断扩大，实验室里充满新生力量，这项功能无疑派得上用场。

加州大学戴维斯分校的助理教授Aldrin Gomes表示：“大多数的凝胶成像系统的用户都不是专家。因此，这些平台应当提供简单而准确的计算机程序，以协助分析和编辑数字图像。”

目前，许多凝胶成像系统已经具备自动曝光、对焦和缩放功能，可实现一键式的图像采集。康宁生命科学的产品经理Ira Augenzucker认为，凝胶成像系统的关键特性之一是“使用简单，维护轻松”。

应用更广泛

“随着检测试剂的选择越来越多，一台系统应当满足科学家的需求，实现实验室中的各种成像应用，”McDonald解释说。“这对于Western blot而言尤为重要，因为多重检测正变得更普及，它能够减少样本量的需求，在提高通量的同时实现更准确的数据定量。”

Gomes也同意McDonald的观点。“凝胶成像系统应该是多功能的。它们需要能成像丽春红、考马斯蓝、荧光染料和化学发光试剂，”他说。在最有用的平台上，科学家可以开展多重检测。正如Gomes所言，“两个或更多的荧光检测模块特别适合磷酸化和非磷酸化蛋白的检测。”

同时，多功能性不仅仅是指检测对象的内容，还包括检测对象的大小。Gomes指出，多功能性也意味着“它可以应对各种大小的印迹，从很小的到很大的印迹。”如今的许多凝胶成像系统都适用于mini、midi等各种规格的凝胶或印迹膜。

当您考虑购买一台凝胶成像系统时，灵活性应是首先要考虑的东西。“如今的实验室设备需要具有多功能性，并且能够扩展到新的应用，”Azure Biosystems营销副总裁Lisa Isailovic说。“凝胶成像系统的一个关键要素是能够升级到新的应用，比如化学发光的Western、近红外的Western及其他荧光应用。这样，一个基因组学的系统就迈入了蛋白质组学的世界。”

Gomes也同意这种说法。他希望，系统能够从一个成像平台（如化学发光）升级到另一个平台（如荧光）。“用户通常不知道他们需要什么样的凝胶或印迹成像系统。”

Gomes指出，化学发光和荧光检测模式各有优缺点。例如，荧光能够实现多重检测，且动态范围比化学发光更好，而红外荧光的灵敏度与化学发光相当，甚至更好。不过他也列出了荧光的一系列缺点，包括荧光信号的强度捉摸不定，这取决于探针的来源，以及成像仪的价格可能更高一些。

对于化学发光检测，Gomes列出了许多优点，包括增强型化学发光（ECL）的灵敏度要高于非红外的荧光基团，以及更多实验室对化学发光成像仪比较熟悉。当然，这种方法也有缺点，比如信号强度通常只能持续几个小时，无法进行多重检测，除非剥离抗体。

定量的结果

过去，凝胶电泳只能带来定性信息，但许多科学家希望将其用在定量应用中。“Western blot通常被认为是半定量的检测，”McDonald说。“不过，定量的Western blot则是非常理想的。”

为了收集可定量的数据，McDonald认为，整个印迹区域内捕获的图像必须提供均一的数据。“如果目标蛋白的图像不均一，那么即使用看家蛋白或总蛋白来标准化，结果也没有任何价值，”他说。

Gomes则认为：“成像系统必须具有高灵敏度。新的CCD照相机带来了高的灵敏度和宽的动态范围。在我看来，X光胶片成像往往带来了无法重复的结果，因此不能用于定量。”不过，他指出化学发光特别是荧光带来了最佳的动态范围。

Augenzucker最后补充说，凝胶成像系统应当快速轻松地捕获各类凝胶的图像，并以各种形式存储，便于打印和发表。他举了个例子：“我们一般在30秒内获得bmp、jpg或tiff格式的图像，且Windows系统支持各种打印选项。”

正如各位专家所提到的，如今的凝胶或印迹成像系统比以往更加易用，也具有更多的高级功能。有了这样的系统，大家只需要少量的蛋白、少量的一抗和二抗，就能获得重复性更好的结果，实现更准确的定量。

（作者：Mike May / 生物通编译）