lite化学发光检测方案:高通量报告基因检测[新品推荐]

【字体: 时间:2018年04月13日 来源:基因有限公司

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  PerkinElmer提供不同的高灵敏度均质性荧光素酶报告基因定量检测系统,只需向荧光素酶融合基因转染的细胞中加入试剂,便能使细胞裂解并进行荧光素酶反应。

荧光素酶(Luciferase)是一系列能催化荧光素(luciferin)氧化并产生生物冷光的氧化酶。和其他荧光蛋白不同,luciferase反应的发光不需要额外的激发光,只要luciferase和底物接触就能产生荧光,发出的光子可以被光敏感元件测到,因此避免了因背景物质被激发而产生的背景荧光干扰。荧光素酶在镁离子存在的情况下,可催化荧光素与ATP反应生成荧光素-AMP(中间体)和焦磷酸(PPi)。然后催化中间体氧化生成AMP、CO2和激发态的氧化荧光素。激发态的氧化荧光素在返回基态时发射出光。


图1:荧光素酶反应示意图

萤火虫荧光素酶是常用的报告基因之一。萤火虫荧光素酶报告基因系统(Firefly luciferase reporter gene assay)是将萤火虫荧光素酶编码基因与目的检测基因序列融合,通过检测其产物发出的荧光来检测目的基因转录活性。PerkinElmer提供不同的高灵敏度均质性荧光素酶报告基因定量检测系统,只需向荧光素酶融合基因转染的细胞中加入试剂,便能使细胞裂解并进行荧光素酶反应。反应试剂中同时包括了能促进细胞裂解的成分和荧光素酶反应的所需底物,且不含DTT,因此是完全无臭味无毒性的。

您可以根据实验的不同灵敏度和信号半衰期要求,从不同的荧光素酶报告基因定量检测系统中选择。PerkinElmer提供不同的荧光素酶报告基因定量检测系统,包括neolite™系列、britelite™ plus系列、steadylite plus™系列、sensilite™ (new)系列和twinlite™ (new)系列。双报告基因检测试剂twinlite™可以检测萤火虫及海肾萤光素酶。

PerkinElmer 报告基因检测系统技术优点为:

▪ 可实现亚飞摩尔高灵敏度检测水平。
▪ 完全无臭味无毒性:不含DTT硫醇类化合物。
▪ 高稳定性,且储存条件为2-8度保存 。
▪ 实验设计更方便 。
▪ 工作液配制后稳定性更好,发光信号持续时间长,可进行连续批量处理。

neolite

neolite™是一个信号稳定,可对哺乳动物细胞中荧光素酶表达量进行高灵敏度检测的均质性辉光型荧光素酶报告基因系统。neolite™强而稳定的荧光信号是专门为了需要高灵敏度和半衰期长的应用和系统而设计的。

通常来说,neolite™的信号半衰期为2.5小时左右,如要获得最强信号,应该在加完试剂后45分钟检测。

总的来说, neolite™具有以下优点:

▪ 高灵敏度
▪ 适合用于批量连续的样品处理
▪ 信号强度高且稳定,
▪ 适合高密度微孔板如384孔板和1536孔板
▪ 不含DTT,无臭味无毒性
▪ 储存方便

图1-a: neolite的灵敏度

图1-b: neolite信号强度随时间的变化

图1-c: neolite在不同培养基中的光输出强度

britelite plus

britelite™ plus是一个可对哺乳动物细胞中荧光素酶表达量的进行高灵敏度检测的均质性辉光型荧光素酶报告基因系统。britelite™ plus适合用于极高通量的微孔板连续处理系统,因为这些流水线系统中,从试剂加入到信号读取的时间间隔相对较短,所以不需要很长的信号半衰期。通常来说,britelite™ plus的信号半衰期为30分钟左右。britelite™ plus相对较短的半衰期造就了较强的光信号输出。

britelite™ plus主要具有以下优点:

▪ 极高灵敏度
▪ 为连续处理系统而设计
▪ 适合高密度微孔板如384孔板和1536孔板
▪ 适合用于需要极高灵敏度的较小规模实验
▪ 不含DTT,无臭味无毒性
▪ 储存方便(2 - 8 °C)

图2-a:britelite™ plus的灵敏度

图2-b: britelite™ plus信号强度随时间的变化

图1-c: britelite™ plus在不同培养基中的光输出强度

steadylite plus™

steadylite plus™是一个信号稳定,可对哺乳动物细胞中荧光素酶表达量的进行高灵敏度检测的均质性辉光型荧光素酶报告基因系统。steadylite plus™是专门为高通量环境中微孔板的批量处理系统而设计的。对于批量处理系统来说,由于样本在添加试剂后需要等待一段时间才能被读取,因此有较长的信号半衰期很重要。通常来说,steadylite plus™的信号半衰期大于4小时,因此可以实现在信号没有太大变化的条件下,大量样本在数小时内完成数据读取。

steadylite plus™主要具有以下优点:

▪ 高灵敏度
▪ 为批量处理而设计
▪ 信号半衰期长
▪ 适合高密度微孔板如384孔板和1536孔板
▪ 不含DTT,无臭味无毒性
▪ 储存方便(2 - 8 °C)

图3-a:steadylite plus™的灵敏度

图3-b: steadylite plus™信号强度随时间的变化

图3-c: steadylite plus™在不同培养基中的光输出强度

sensilite™

sensilite™是一个强化的,具有极高灵敏度(闪光型)的萤火虫荧光素酶的检测系统,用于哺乳动物细胞中荧光素酶的表达量进行定量检测。由于该试剂需要在加入试剂后较短时间内读数,sensilite™需要配合带有分液器的酶标仪使用。sensilite™所提供的最大的荧光强度,是专门为需要极高灵敏度的实验设计的。sensilite™需要在添加试剂后即进行读数。sensilite™实验操作简便,适用于离心管,96孔板和384孔板的形式。sensilite™特别适合应用于需要最大灵敏度的研究,如基因转录调控,miRNA, 信号转导和病毒复制区域,以及需要进行连续处理的高通量实验方法。

sensilite™主要具有以下优点:

▪ 极高的灵敏度。
▪ 配合带有移液器的光度计使用。
▪ 兼容于配有96孔板,384孔板和离心管模式的酶标仪。
▪ 用于检测需要最大灵敏度的微量样本。
▪ 不含DTT,无臭味无毒性
▪ 储存方便(2 - 8 °C)
▪ 即使在配液后也能有良好的稳定性。

twinlite™

twinlite™是一个专门为定量检测萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶而设计的双荧光素酶报告基因系统。由于该试剂盒需要在加入试剂后较短时间内读数,因此它需要用于配有两个分液器的光度计。twinlite™是一个极度灵敏(闪光型)的双荧光素酶报告基因系统,其所提供的最大的荧光强度,是专门为需要极高灵敏度的实验设计的。twinlite™实验操作简便,适用于离心管,96孔板和384孔板的形式。twinlite™适合应用于需要最大灵敏度的研究,如基因转录调控,miRNA, 信号转导和病毒复制区域,以及需要进行连续处理的高通量实验方法。

twinlite™主要具有以下优点:

▪ 极高的灵敏度。
▪ 配合带有移液器的光度计使用。
▪ 适用于96孔板和384孔板的酶标仪,以及离心管形式的光度计。
▪ 用于检测需要最大灵敏度的微量样本。
▪ 不含DTT,无臭味无毒性
▪ 储存方便(2 - 8 °C)
▪ 即使在配液后也能有良好的稳定性。
▪ 便捷的两步连续法:把细胞裂解后,只要简单地混合和立即读数即可。

您可以根据实验的不同灵敏度和信号半衰期要求,选择合适的lite报告基因产品


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