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去泛素化酶USP过表达质粒,无需自己动手构建
【字体: 大 中 小 】 时间:2018年06月28日 来源:PPL质粒库
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PPL质粒库前期开发了USP家族相关过表达质粒,选用pcDNA3.1(+)-Myc-his哺乳动物过表达载体,高效的CMV启动子利于USP蛋白在细胞中的表达,Myc标签能帮助蛋白的有效检测,His标签方便纯化对应的泛素化酶用于开展体外实验。
泛素化是常见的蛋白质翻译后修饰方式之一,参与生物体内细胞分裂与分化、生长发育、转录调节、损伤应激、 免疫应答等多方面的生理活动。去泛素化酶 (deubiquitylating enzymes)作为一类可以移除泛素的异肽酶类, 具有结构和功能的多样性,去除泛素化修饰,影响蛋白功能,调控生理活动。已知 DUB 的生理功能主要包含四大类:代谢与应激、肿瘤与癌症、感染与免疫、干细胞与发育调控.目前对去泛素化酶的作用机理研究还不够深入,需要开展的工作还很多。
去泛素化酶主要有六大类:USP 家族、UCH 家族、JAMM 家族 、OTU 家族、MJD和 MCPIP 家族,USP超家族是目前已知的去泛素化酶中成员最多,且结构最具多样性的一类,属于半胱氨酸蛋白酶,如USP1、USP3、USP11和USP28等。这些酶分子含有两个短的高度保守的序列即Cys结构域和His结构域,序列中具有起催化作用的三联残基即半胱氨酸、组氨酸、天冬氨酸/天冬酰胺,能将泛素分子从大的蛋白分子上移除(见下图),消除泛素化蛋白质的生物学功能,在DNA损伤修复及肿瘤的发生发展过程中起着关键的调控作用,是研究的热点。
蛋白质的去泛素化修饰过程
质粒——只是工具,难道还用自己构建?
PPL质粒库前期开发了USP家族相关过表达质粒,选用pcDNA3.1(+)-Myc-his哺乳动物过表达载体,高效的CMV启动子利于USP蛋白在细胞中的表达,Myc标签能帮助蛋白的有效检测,His标签方便纯化对应的泛素化酶用于开展体外实验。
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PPL01478-2a | pcDNA3.1-myc-His-USP2 | USP2 | Homo sapiens (human) | 9099 | BC002854 |
PPL01479-2a | pcDNA3.1-myc-His-USP3 | USP3 | Homo sapiens (human) | 9960 | BC018113 |
PPL01480-2a | pcDNA3.1-myc-His-USP4 | USP4 | Homo sapiens (human) | 7375 | BC125131 |
PPL01463-2a | pcDNA3.1-myc-His-USP7 | USP7 | Homo sapiens (human) | 7874 | NM_003470.2 |
PPL01481-2a | pcDNA3.1-myc-His-USP8 | USP8 | Homo sapiens (human) | 9101 | BC110590 |
PPL00182-2b | pcDNA3.1-myc-His-USP10 | USP10 | Homo sapiens (human) | 9100 | BC000263 |
PPL01578-2b | pcDNA3.1-myc-His-USP11 | USP11 | Homo sapiens (human) | 8237 | NM_004651.3 |
PPL01482-2a | pcDNA3.1-myc-His-USP12 | USP12 | Homo sapiens (human) | 219333 | BC026072 |
PPL01433-2b | pcDNA3.1-USP13-Myc-His | USP13 | Homo sapiens (human) | 8975 | BC016146 |
PPL00930-2b | pcDNA3.1-USP14-Myc-His | USP14 | Homo sapiens (human) | 9097 | BC003556 |
PPL01509-2a | pcDNA3.1-USP15-Myc-His | USP15 | Homo sapiens (human) | 9958 | BC125123 |
PPL01518-2a | pcDNA3.1-USP16-Myc-His | USP16 | Homo sapiens (human) | 10600 | BC030777 |
PPL01506-2a | pcDNA3.1-USP18-Myc-His | USP18 | Homo sapiens (human) | 11274 | BC014896 |
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PPL00744-2a | pcDNA3.1-USP21-Myc-His | USP21 | Homo sapiens (human) | 27005 | BC090946 |
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PPL01508-2a | pcDNA3.1-USP24-Myc-His | USP24 | Homo sapiens (human) | 23358 | BC029660 |
PPL01511-2a | pcDNA3.1-USP25-Myc-His | USP25 | Homo sapiens (human) | 29761 | BC075792 |
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PPL01453-2a | pcDNA3.1-USP28-Myc-His | USP28 | Homo sapiens (human) | 57646 | BC065928 |
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PPL00928-2a | pcDNA3.1-USP30-Myc-His | USP30 | Homo sapiens (human) | 84749 | BC004868 |
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PPL01456-2a | pcDNA3.1-USP33-Myc-His | USP33 | Homo sapiens (human) | 23032 | BC016663 |
PPL01457-2a | pcDNA3.1-USP34-Myc-His | USP34 | Homo sapiens (human) | 9736 | BC107761 |
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PPL01459-2a | pcDNA3.1-USP36-Myc-His | USP36 | Homo sapiens (human) | 57602 | BC071582 |
PPL01460-2a | pcDNA3.1-USP37-Myc-His | USP37 | Homo sapiens (human) | 57695 | BC112901 |
PPL01470-2a | pcDNA3.1-USP38-Myc-His | USP38 | Homo sapiens (human) | 84640 | BC068975 |
PPL00931-2b | pcDNA3.1-USP39-Myc-His | USP39 | Homo sapiens (human) | 10713 | BC067273 |
PPL00943-2a | pcDNA3.1-USP40-Myc-His | USP40 | Homo sapiens (human) | 55230 | BC013305 |
PPL00183-2b | pcDNA3.1-USP44-Myc-His | USP44 | Homo sapiens (human) | 84101 | BC030704 |
PPL01471-2a | pcDNA3.1-USP45-Myc-His | USP45 | Homo sapiens (human) | 85015 | BC005991 |
PPL01472-2a | pcDNA3.1-USP46-Myc-His | USP46 | Homo sapiens (human) | 64854 | BC037574 |
PPL01473-2a | pcDNA3.1-USP47-Myc-His | USP47 | Homo sapiens (human) | 55031 | BC000226 |
PPL01176-4a | pCD513B-1-USP48-Flag | USP48 | Homo sapiens (human) | 84196 | NM_032236.7 |
PPL01474-2a | pcDNA3.1-USP49-Myc-His | USP49 | Homo sapiens (human) | 25862 | BC014176 |
PPL01475-2a | pcDNA3.1-USP53-Myc-His | USP53 | Homo sapiens (human) | 54532 | BC017382 |
PPL01476-2a | pcDNA3.1-USP54-Myc-His | USP54 | Homo sapiens (human) | 159195 | BC130633 |
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PPL,全称Public Protein/Plasmid Library(质粒与蛋白共享库),为生命科学研究提供质粒、蛋白、慢病毒、稳转细胞株等相关工具性产品和服务,在CAR-T研究、细胞自噬研究、细胞永生化研究等领域有丰富优质的产品,提供相关领域的全面技术解决方案。
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1、质粒:过表达、shRNA、报告基因、mircoRNA等,两万余种产品,覆盖面全,质量保证,费用合理,免去实验室在质粒构建方面花费太多的精力和经费。
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