如何确定数字PCR的空白检测限LOB?

【字体: 时间:2019年05月29日 来源:深蓝云生物

编辑推荐:

  数字PCR技术是一项新的核酸检测和定量技术。空白检测限LOB (Limit of Blank)是判断数字PCR技术检测能力的重要参数。

数字PCR技术是一项新的核酸检测和定量技术。空白检测限LOB(Limit of Blank)是判断数字PCR技术检测能力的重要参数。

LOB(the limit of blank)是一项统计学实验参数。在可信度大于95%的概率下,对于不含有分析物的样品(空白样品),LOB是可能观察到的最高检测结果。换句话说就是最大的假阳性数。

为什么要在数字PCR中计算LOB ?

在数字PCR (dPCR)中,多种因素可以引起假阳性。定量核酸时确定假阳性的cutoff对dPCR检测的稳定性至关重要。为了定义这个cutoff,检测阈值通常设置在LOB值之上,而在检测校准期间必须首先为每个目标确定空白LOB值。此外,实验LOB值对于判断反应是正还是负以及计算LOD值都是必要的。

95%置信度LOB如下表所示:

其中:

R:重复次数,一般≧30
μ和α:分别为假阳性个数的平均值和标准方差
μcorr:校正平均值

当μ=0(即假阳性永远不会出现),则LOB(95%)=0
当LOB为非零时,可以用概率分布加权的“减去假阳性”的方法来校正实验样品中目标核酸的量。

更多LOB值介绍可登陆Gene-π数字PCR学堂(www.cycloudbio.com数字PCR学堂快速入口)统计工具查看,您也可以选择其他感兴趣的应用教程,其中包含从实验设计到数据分析的详细工作流程。 您还可以通过搜索导航工具直接搜索特定的项目("dPCR的DNA准备","荧光溢出"等),或点击我们的"HOW TO" 选择您需要的部分(设计、分析、报告)。

联系我们:

北京深蓝云生物科技有限公司
地址:北京市北京经济技术开发区经海四路25号院2号楼2单元2层201室
电话:010-57256059
邮箱:info@cycloudbio.com
官网:www.cycloudbio.com

我来说两句
0  条评论    0 人次参与
登录 注册发布
最新评论刷新
查看更多评论 > >

订阅生物通快讯

订阅快讯:

最新文章

限时促销

会展信息

关注订阅号/掌握最新资讯

生物通首页 | 今日动态 | 生物通商城 | 人才市场 | 核心刊物 | 特价专栏 | 仪器龙虎榜

版权所有 生物通

Copyright© eBiotrade.com, All Rights Reserved

联系信箱:

粤ICP备09063491号