如何确定数字PCR的空白检测限LOB?

数字PCR技术是一项新的核酸检测和定量技术。空白检测限LOB（Limit of Blank）是判断数字PCR技术检测能力的重要参数。

LOB（the limit of blank）是一项统计学实验参数。在可信度大于95%的概率下，对于不含有分析物的样品（空白样品），LOB是可能观察到的最高检测结果。换句话说就是最大的假阳性数。

为什么要在数字PCR中计算LOB ?

在数字PCR (dPCR)中，多种因素可以引起假阳性。定量核酸时确定假阳性的cutoff对dPCR检测的稳定性至关重要。为了定义这个cutoff，检测阈值通常设置在LOB值之上，而在检测校准期间必须首先为每个目标确定空白LOB值。此外，实验LOB值对于判断反应是正还是负以及计算LOD值都是必要的。

95%置信度LOB如下表所示：

其中：

R：重复次数，一般≧30
μ和α：分别为假阳性个数的平均值和标准方差
μ_corr：校正平均值

当μ=0（即假阳性永远不会出现），则LOB（95%）=0
当LOB为非零时，可以用概率分布加权的“减去假阳性”的方法来校正实验样品中目标核酸的量。

更多LOB值介绍可登陆Gene-π数字PCR学堂（www.cycloudbio.com数字PCR学堂快速入口）统计工具查看，您也可以选择其他感兴趣的应用教程，其中包含从实验设计到数据分析的详细工作流程。 您还可以通过搜索导航工具直接搜索特定的项目（"dPCR的DNA准备"，"荧光溢出"等），或点击我们的"HOW TO" 选择您需要的部分（设计、分析、报告）。

联系我们：

北京深蓝云生物科技有限公司
地址：北京市北京经济技术开发区经海四路25号院2号楼2单元2层201室
电话：[phone]
邮箱：[e-mail]
官网：www.cycloudbio.com