Science:在单颗粒Cryo-EM中将移动问题降至最低

【字体: 时间:2020年10月10日 来源:EurekAlert中文

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  这将大大加快确定结构的速度,尤其是在高分辨率情况下。

  

尽管单颗粒低温电子显微技术(cryo-EM)使人们能够进入以前难以处理的蛋白质结构,而且在最近就我们对SARS-CoV-2结构的深入了解助益良多,但该技术仍存在某些短板。这些弱点之一是有关简单运动的信息丢失。他们说,在某项新的研究中,研究人员报告了一种新颖的、可以更好支持标本成像的网格,它可以提高图像品质和采集效率。

Micah Rapp和Bridget Carragher在相关的《视角》中写道:“令人鼓舞的是,通过开发一种可及、廉价的硬件,[这些研究人员]可令所有的执业医生在网格一旦商业化后极快地获得更好的影像。”

在cryo-EM中,每个样品都是悬浮在EM网格支撑膜上的一个玻璃化层的蛋白质。尽管该技术最近取得了进展,但主要障碍仍然存在,其中包括通过电子束损坏而丢失的有关标本的最高分辨率信息以及样本移动造成的模糊。

Katerina Naydenova和同事进行的分析表明,成像时标本移动的主要原因是玻璃化冰层的屈曲。基于这些见解,他们创建了一种具有最佳厚度的支撑膜,它可减少样本的总体移动。他们称其黄金标本支撑为“ hexAuFoil”。它具有比传统的样品架更小、孔洞更密集等特征。

他们说,使用该支持系统大大增加了数据通量。所产生的微不足道的颗粒位移可外推至“零接触”结构因素,从而揭示出在低温EM结构中通常丢失的特征。他们指出,这将大大加快确定结构的速度,尤其是在高分辨率情况下。

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