抗体药工艺中的**支纯化柱，使用Protein A亲和柱一定是*好的吗？

广泛使用的传统方法将Protein A暴露在了大量生物负荷的**线。为了在经济上可行，Protein A亲和柱必须循环使用上百次，尽管它们对NaoH的原位清洗（CIP）程序很敏感，而且即使使用苛刻的CIP方法，实际上也无法去除某些污垢成分。而提高Protein A亲和柱的性能和树脂寿命已成为下游工艺研发的重点。因此，能否保护这一关键组件免受损害，而又维持甚至提高整个工艺效率和经济性？单抗纯化，我们不一样！关于治疗性单抗的生产工艺，推荐您一个来自Bio-Works 公司开发的“新趋势单抗平台”。

在诸如癌症和类风湿性关节炎之类的困难疾病治疗中，单克隆抗体（mAb）通常被认为是安全有效的，所以单抗药物的市场不断增长。随着市场需求的不断增长，企业之间竞争的不断加剧，伴随而来的带给单抗药物生产商们更多的是改善运营的压力。面对压力，不断寻求纯化工艺的创新策略，以及筛选更有效的纯化树脂始终被重视。Bio-Works致力于纯化填料的生产，不仅仅提供更高效的纯化树脂，更是在抗体纯化工艺中提出了独到的优化策略，可帮助单抗生产改善纯化工艺，同时在生产中实现成本效益。
 
传统的抗体工艺纯化过程

传统的抗体纯化经典三步骤是（CEP）： (i) 目标产物的浓缩和有害杂质的去除 (Capture), (ii) 进一步去除大量杂质(Enhance), (iii) *后，去除剩余的痕量杂质和不需要的目标产物结构变体，例如多聚体(Polish)。

由此可见，这种广泛使用的传统方法将Protein A暴露在了大量生物负荷的**线。为了在经济上可行，Protein A亲和柱必须循环使用上百次，尽管它们对NaoH的原位清洗（CIP）程序很敏感，而且即使使用苛刻的CIP方法，实际上也无法去除某些污垢成分。而提高Protein A亲和柱的性能和树脂寿命已成为下游工艺研发的重点。因此，我们能否保护这一关键组件免受损害，而又维持甚至提高整个工艺效率和经济性？或许，确实有一种方法能够使杂质（HCP包括蛋白酶和HCD）早日快速去除，进而延长Protein A亲和柱的使用寿命，或者使其免受苛刻的CIP清洗。那么，如何通过保护Protein A亲和纯化树脂来提高整体纯化工艺经济效益?

优化的抗体纯化策略——ECP 策略

Enhanced Capture Process（ECP）策略是指在使用高选择性的捕获步骤之前，首先去除原料中潜在的有害成分，然后再进行捕获和后续的精制，对产品纯度的提高和工艺性能都有明显的助益。这种方法的有效性已经得到证明。例如，如上所述在纯化抗体时，在Protein A亲和层析的上游使用高耐盐阴离子交换树脂WorkBeads™ 40 TREN预保护层析，用以保护Protein A柱免受大量杂质的生物负荷，并降低对严苛CIP清洗的需要。

添加预保护柱可以带来什么？

WorkBeads™40TREN耐高盐阴离子交换层析（IEX）树脂，在低于pH9环境中带正电荷。该树脂已被证明可有效去除染色质复合物，内毒素和宿主细胞蛋白质。而大多数抗体在中性或低pH下带正电荷，因此在该pH区间内不会与WorkBeads™40 TREN结合。且该树脂与普通离子交换层析树脂不同，其耐高盐的特性，允许发酵液不需要经过稀释就可以使用WorkBeads™ 40 TREN进行杂质的预处理。

1、预先去除宿主残留蛋白质（HCPs）和DNA（HCD），保护Protein A亲和柱免受大量的生物负荷累积，延长Protein A亲和柱的使用时间，降低*终产品的销售成本（COGS)；
2、可一定程度上提升Protein A亲和柱的动态结合载量（10% - 20%）；
3、非常快速的去除宿主细胞中的蛋白酶，除可以保护单抗外，还可降低对其对Protein A的水解，减少Protein A配体的泄露；
4、 标准化进入到Protein A亲和柱的样本状态，而无需考虑细胞培养状态，细胞死亡程度和宿主蛋白/DNA的残留量，提高纯化工艺结果的重复性；
5、 更加容易实现分批上样，从而可使用更小体积的Protein A亲和柱。

WorkBeads™ affimAb专为超纯mAb纯化而设计

单抗药物经常需要重复的高剂量给药，且药物相关的杂质与剂量相关，即使是微量杂质也可能导致很大的累积效应，因此单抗药物治疗对纯度要求非常严格。Bio-Works品牌其琼脂糖纯化树脂WorkBeads™不同于以往的产品，被称为“新一代纯化树脂”，可以实现比市场上常规树脂更高的纯化纯度。这类树脂的典型特征是它们由具有高孔隙率的小琼脂糖珠组成，由特殊的交联生产方法，因此即使在高流速下也非常稳定。WorkBeads™ affimAb无论在对单抗的动态结合载量(dynamic binding capacity，DBC)、选择性（selectivity）、Protein A 配体泄露，NaOH清洗的耐受性等方面，都有卓越的数据表现；WorkBeads™ affimAb所提供的是载量和选择性之间的*佳平衡（optimal balance between capacity and selectivity）。简而言之，Bio-Works的纯化树脂可以改善您的mAb纯化工艺，同时帮助您提高生产成本效益。