猪流感病毒RT-PCR检测方法

2020年6月底，中国科学家在著名期刊《美国国家科学院院刊》上发表了猪流感病毒最新研究成果，得出了两个听起来很令人焦虑的结论：

• 预测重组流感病毒G4 EA H1N1，已经具备了在人群中大流行的所有基本特征；
• 经过血清检测，有10.4%（35/338）的猪场养殖工人检测结果呈阳性，意味着人类已经或正在被感染。

Takara快速应对，在7月中旬，以探针法One Step RT-qPCR检测试剂为基础，推出了Takara猪流感病毒检测解决方案。

前情提要：《有备无患，从容应对——Takara猪流感病毒检测解决方案》

由于猪能同时感染一种以上的病毒类型，这些病毒的基因通过重组、插入或缺失等突变，不断“进化”，进而形成可感染人类的新型病毒。随着世界各地猪群中新的流感病毒株的不断出现，大家对猪流感病毒的不同检测方法开始产生兴趣。但是每一种检测方法都有其各自的优缺点，比如检测速度快慢、准确率和成本等。

今天，给大家介绍一种以PCR技术为基础的猪流感病毒检测方法及Takara对应的明星产品，对于检测样本量较大，且对检测准确率和成本有一定要求的客户，尤为适用。

《GB/T 27521-2011猪流感病毒核酸RT-PCR检测方法》
基于国标的猪流感病毒核酸RT-PCR检测方法，以活猪鼻拭子，或病死猪的肺脏、气管分泌物等为起始样本，提取待检测样本的RNA，进行一步法或者两步法的RT-PCR扩增。

检测同时设立阴性及阳性对照，阳性对照需在预期大小的条带位置出现特异性条带，阴性对照则无扩增产物。在阴性及阳性对照同时成立的前提下，对检测结果进行判定，通过在所用引物预期扩增片段的位置是否出现特异性条带，来判断猪流感病毒核酸检测的阴性或阳性。

此外，GB/T 27521-2011附录中提供反转录引物及PCR引物信息。

对于猪流感病毒检测，Takara能够提供完善的解决方案，为从事动物疫病检测防治企业提供全方位的支持。关于猪流感病毒的RT-PCR检测方法，Takara能够提供如下产品及服务：

检测用引物合成

Takara公司提供 DNA/RNA合成服务，特别在各种修饰与标记DNA与RNA的合成方面积累了丰富的经验，我们的优势如下：

病毒核酸提取 

TaKaRa MiniBEST Viral RNA/DNA Extraction Kit Ver.5.0 (Code No.9766) 是专门用于从血浆、全血、无细胞体液、病毒原液和感染病毒的组织中提取各种病毒 (Virus) RNA/DNA的小量柱式纯化试剂盒。试剂盒采用了特别的病毒裂解系统，由病毒裂解液裂解病毒释放RNA或DNA，再结合核酸制备膜技术纯化RNA或DNA，适用于各种RNA或DNA病毒的核酸提取。本试剂盒具有高效、快速、方便之特点，病毒裂解后，提取操作仅需20分钟便可完成。本试剂盒配有Carrier RNA可提取样品中微量的RNA/DNA。

PrimeScript RT-PCR检测试剂 

PrimeScript RT-PCR System比较

病毒&病原菌检测，推荐使用操作简单、污染几率低的一步法RT-PCR试剂盒，Takara根据反转录酶及PCR扩增用酶的不同，提供了两种类型的产品，可供选择：

• 为了有效地进行RT-PCR实验时

• 追求保真性的RT-PCR时

反转录酶、PCR酶、Marker等检测试剂 

产品	Code No.	包装量	用途
RNase-OFF™	9037	500 ml	去除RNase污染
RNAiso Plus	9108	100 ml	试剂型Total RNA提取
Reverse Transcriptase M-MLV (RNase H-)	2641A	10,000 U	高性价比的反转录酶
PrimeScript™ Reverse Transcriptase	2680A	10,000 U	高性能反转录酶
PrimeScript™ II Reverse Transcriptase	2690A	10,000 U	添加辅助蛋白的高性能反转录酶
Recombinant RNase Inhibitor	2313A	5,000 U	RNase抑制剂
TaKaRa Taq™ Hot Start Version	R007A等	多种包装	基础PCR酶
TaKaRa Ex Taq™	RR001A等	多种包装	良好扩增效率，高通用性的畅销PCR酶
dNTP Mixture	4030	各3.2 μmol/1.28 ml	PCR底物
dNTP Mixture	4019	各2.5 μmol/250 μl	PCR底物
RNase-free Water	9012	1 ml×10 支	RNA实验用水
DL1,000 DNA Marker	3591A	500 μl	DNA Marker
100 bp DNA Ladder (Dye Plus)	3422A	500 μl	DNA ladder

普通PCR仪

TaKaRa PCR Thermal Cycler Dice Touch
Code: TP350

Takara可以根据客户的需求，提供不同体积、不同包装量的产品，从基础的DNA聚合酶到成型的试剂盒，再到订制产品，总有一款能满足您的实验需求。

Takara致力于为全球科学家提供高质量、高稳定性的产品和服务，Takara愿与科研人员一同，披荆斩棘，克服难关，为人类更好的明天贡献一份力量。

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