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猪流感病毒RT-PCR检测方法

【字体: 时间:2020年09月04日 来源:Takara

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  今天,给大家介绍一种以PCR技术为基础的猪流感病毒检测方法及Takara对应的明星产品,对于检测样本量较大,且对检测准确率和成本有一定要求的客户,尤为适用。

2020年6月底,中国科学家在著名期刊《美国国家科学院院刊》上发表了猪流感病毒最新研究成果,得出了两个听起来很令人焦虑的结论:

  • 预测重组流感病毒G4 EA H1N1,已经具备了在人群中大流行的所有基本特征;
  • 经过血清检测,有10.4%(35/338)的猪场养殖工人检测结果呈阳性,意味着人类已经或正在被感染。

Takara快速应对,在7月中旬,以探针法One Step RT-qPCR检测试剂为基础,推出了Takara猪流感病毒检测解决方案。

前情提要:《有备无患,从容应对——Takara猪流感病毒检测解决方案》

由于猪能同时感染一种以上的病毒类型,这些病毒的基因通过重组、插入或缺失等突变,不断“进化”,进而形成可感染人类的新型病毒。随着世界各地猪群中新的流感病毒株的不断出现,大家对猪流感病毒的不同检测方法开始产生兴趣。但是每一种检测方法都有其各自的优缺点,比如检测速度快慢、准确率和成本等。

今天,给大家介绍一种以PCR技术为基础的猪流感病毒检测方法及Takara对应的明星产品,对于检测样本量较大,且对检测准确率和成本有一定要求的客户,尤为适用。

《GB/T 27521-2011猪流感病毒核酸RT-PCR检测方法》
基于国标的猪流感病毒核酸RT-PCR检测方法,以活猪鼻拭子,或病死猪的肺脏、气管分泌物等为起始样本,提取待检测样本的RNA,进行一步法或者两步法的RT-PCR扩增。

检测同时设立阴性及阳性对照,阳性对照需在预期大小的条带位置出现特异性条带,阴性对照则无扩增产物。在阴性及阳性对照同时成立的前提下,对检测结果进行判定,通过在所用引物预期扩增片段的位置是否出现特异性条带,来判断猪流感病毒核酸检测的阴性或阳性。

此外,GB/T 27521-2011附录中提供反转录引物及PCR引物信息。

对于猪流感病毒检测,Takara能够提供完善的解决方案,为从事动物疫病检测防治企业提供全方位的支持。关于猪流感病毒的RT-PCR检测方法,Takara能够提供如下产品及服务:

检测用引物合成

Takara公司提供 DNA/RNA合成服务,特别在各种修饰与标记DNA与RNA的合成方面积累了丰富的经验,我们的优势如下:

病毒核酸提取 

TaKaRa MiniBEST Viral RNA/DNA Extraction Kit Ver.5.0 (Code No.9766) 是专门用于从血浆、全血、无细胞体液、病毒原液和感染病毒的组织中提取各种病毒 (Virus) RNA/DNA的小量柱式纯化试剂盒。试剂盒采用了特别的病毒裂解系统,由病毒裂解液裂解病毒释放RNA或DNA,再结合核酸制备膜技术纯化RNA或DNA,适用于各种RNA或DNA病毒的核酸提取。本试剂盒具有高效、快速、方便之特点,病毒裂解后,提取操作仅需20分钟便可完成。本试剂盒配有Carrier RNA可提取样品中微量的RNA/DNA。

PrimeScript RT-PCR检测试剂 

PrimeScript RT-PCR System比较

病毒&病原菌检测,推荐使用操作简单、污染几率低的一步法RT-PCR试剂盒,Takara根据反转录酶及PCR扩增用酶的不同,提供了两种类型的产品,可供选择:

• 为了有效地进行RT-PCR实验时

• 追求保真性的RT-PCR时

反转录酶、PCR酶、Marker等检测试剂 

产品 Code No. 包装量 用途
RNase-OFF™ 9037 500 ml 去除RNase污染
RNAiso Plus 9108 100 ml 试剂型Total RNA提取
Reverse Transcriptase M-MLV (RNase H-) 2641A 10,000 U 高性价比的反转录酶
PrimeScript™ Reverse Transcriptase 2680A 10,000 U 高性能反转录酶
PrimeScript™ II Reverse Transcriptase 2690A 10,000 U 添加辅助蛋白的高性能反转录酶
Recombinant RNase Inhibitor 2313A 5,000 U RNase抑制剂
TaKaRa Taq™ Hot Start Version R007A等 多种包装 基础PCR酶
TaKaRa Ex Taq RR001A等 多种包装 良好扩增效率,高通用性的畅销PCR酶
dNTP Mixture 4030

各3.2 μmol/1.28 ml

PCR底物
dNTP Mixture 4019 各2.5 μmol/250 μl PCR底物
RNase-free Water 9012 1 ml×10 支 RNA实验用水
DL1,000 DNA Marker 3591A 500 μl DNA Marker
100 bp DNA Ladder (Dye Plus) 3422A 500 μl DNA ladder

普通PCR仪

TaKaRa PCR Thermal Cycler Dice Touch
Code: TP350

Takara可以根据客户的需求,提供不同体积、不同包装量的产品,从基础的DNA聚合酶到成型的试剂盒,再到订制产品,总有一款能满足您的实验需求。

Takara致力于为全球科学家提供高质量、高稳定性的产品和服务,Takara愿与科研人员一同,披荆斩棘,克服难关,为人类更好的明天贡献一份力量。

获取猪流感病毒RT-PCR检测方法的详细资料

更多详情请点击:
Takara Bio中国官网

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