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稀有单细胞挑选利器——CellEctor单细胞挑选系统

【字体: 时间:2020年09月08日 来源:基因有限公司

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  德国MMI公司的CellEctor单细胞挑选系统,主要用于识别、挑取和转移悬液中单细胞或单一类型细胞。借助高清晰度的CCD成像,操作者可以直观地看到目的细胞,随后通过操控软件控制毛细管高效地完成对悬浮细胞或半贴壁细胞的挑取和转移。

有些细胞在血液和组织中的含量很少但却很重要,比如干细胞、循环肿瘤细胞、循环内皮细胞、残留病变细胞等。对这些细胞进行功能以及测序、实时荧光定量PCR、蛋白质组学等分子水平的准确的检测分析是理解疾病进程和发育机制的关键。然而稀有单细胞的获取并不是一件容易的事,会受到样本质量、挑选方法等因素的影响。

德国MMI公司的CellEctor单细胞挑选系统,主要用于识别、挑取和转移悬液中单细胞或单一类型细胞。借助高清晰度的CCD成像,操作者可以直观地看到目的细胞,随后通过操控软件控制毛细管高效地完成对悬浮细胞或半贴壁细胞的挑取和转移。比如挑选CTC、干细胞等。整个过程可视化、操作简单、挑取准确,对各种类型的单细胞挑选游刃有余。目前已经成功应用于乳腺癌CTC、胰腺癌CTC以及肠胃癌CTC的单细胞挑选。

发表于BMC Cancer的这篇文献作者从单细胞转录水平的基因表达分析出发,发现胰腺肿瘤细胞转移和循环肿瘤细胞单细胞转录本表达异质性有关。文中作者从2015年到2017年对21位病人化疗前后多个时间点收集血样作为研究样本。采用Lymphoprep™密度梯度离心法得到单核细胞,采用磁珠阴性筛选的方法去除表达CD45, CD16, CD19, CD163和 CD235a/GYPA的淋巴细胞。对可能的CTC细胞进行荧光染色 Hoechst 33,342、antibodies EpCAM-FITC、MCAM-FITC  和 CD45-DyLight550,利用 MMI CellEctor Plus (Molecular Machines & Industries)挑选单个的CTC细胞,进行单细胞RT-qPCR实验对CTC细胞EPCAM、CDH2、CD24等13个基因的转录水平的表达进行分析。

图中可以清晰看到CTC细胞核(Hoechst 33,342)以及肿瘤生物标志物(EpCAM-MCAM)阳性表达和CD45阴性表达。

对单个胰腺CTC细胞转录水平的基因表达分析确定了不同的亚型,然而在明显同质的癌细胞系中也观察到单细胞之间转录水平的基因表达的异质性。而这些转录本的差异影响CTC细胞的亚型,很可能与胰腺肿瘤细胞的转移相关。

发表于ecancer上面的文献中,作者利用MMI的CellEctor Plus单细胞挑选技术捕获乳腺癌CTC细胞继而进行表达谱分析,并做了体外肿瘤微球的培养。

用绿色荧光标记肿瘤细胞标志物EpCAM(膜上皮细胞黏附分子),PI标记死细胞核,利用MMI CellEctor Plus单细胞挑选技术捕获活的循环肿瘤细胞。

分别对手术前后病人CTC细胞的表达谱进行分析,发现CTC在患者术前术后存在明显的异质性。  

CellEctor仪器特点:

德国Molecular Machine & Industries (MMI)是专门致力于将显微操作技术与高精度激光技术相结合应用于生命科学领域的一家专业公司,其标志性产品MMI CellCut激光显微切割系统和CellEctor单细胞挑选系统成为目前世界上性能优异的样本处理系统。基因有限公司作为一家专业性的生命科学仪器、试剂供应商,自1992年成立以来一直秉承着“基因燃亮生命,生物技术连接世界”的宗旨,力求将最先进的技术方法推荐到国内,为广大客户提供包括技术咨询、产品选配、售后培训及维护的专业服务体系,并作为MMI全国性代理商,可为感兴趣的客户提供专业的产品咨询、技术答疑及联系试用等,欢迎大家前来咨询。

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