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新学期新技巧——转染效率评估定量化神器

【字体: 时间:2021年08月25日 来源:基因有限公司

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  Luna FL全自动细胞计数仪整合了用于明场信号和荧光信号检测的光学模块,结合人性化的图像分析软件,可进行GFP转染效率定量化的评估。

细胞转染实验是真核细胞掺入外源DNA而获得新的遗传标志的过程。转染方法有多种,分为化学转染、生物转染和物理转染。实验中影响转染效率的因素有很多,比如所选用的转染试剂,转染底物的用量以及两者的比例、细胞的数量与状态。这就需要选择一种定量化的方法对转染效率进行评估,从而确认最优的转染方法以及条件。

常用的转染效率评估方法是使用GFP报告基因,通过荧光显微镜或者流式细胞仪检测GFP蛋白的表达来评估目的基因的表达,荧光显微镜通过查看表达荧光蛋白的细胞所占比例进行估算,往往无法得到定量化的结果;流式细胞仪虽然可以得到定量化的结果,但使用门槛较高且操作较复杂,比如:上机前操作、上机时间及荧光强度(荧光猝灭)、仪器调校情况等诸多因素都要进行考虑。

Luna FL 全自动细胞计数仪可以简单、快速地进行GFP转染效率的评估。它整合了明场信号和荧光场信号的检测模块,首先,进行阴性对照的检测,阴性对照的样本为未转染的细胞,阴性对照信号作为细胞的荧光背景,然后检测转染后的细胞,发出比背景荧光强度高的信号的细胞被认为是"阳性转染细胞",输出数据结果不仅可以看到图片结果,还可以直接得出定量的转染效率评估数据。

检测结果图片


阴性对照:未转染细胞检测图


荧光图片:GFP荧光蛋白信号检测图


合并图片:将阴性对照和荧光图片合并图

定量结果数据


转染数据可直接得出定量化数字数据,一目了然

使用Luna FL进行GFP转染效率评估有众多的优点:数据定量化,兼容可重复性耗材无耗材成本,机型小巧,操作简单,不需要专门培训,不需要专门的操作员,仪器无需维护,准确性高。

除此之外,Luna FL还可以进行台盼兰染色/非染色的明场计数、荧光场如AO/PI染料的细胞计数和活性检测,酵母细胞的计数和活性检测。

小小仪器,大大用处。欲了解更多关于Luna FL全自动细胞计数仪的信息,欢迎扫描下方微信二维码与我们技术人员一对一在线联系或联系您身边的基因有限公司员工,即日起可以申请免费试用哦!

 

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