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  • 蛋白质印迹手册8:开发一种新的转印操作

    尽管上一节提到缓冲液和转印条件的选择可能非常复杂,但Towbin等定义的槽转印系统(1979)和由Kyhse-Anderson定义的半干转印系统(1984)能适用于大部分的蛋白质样品。这两者都代表了出色的起点。不过,假如它们的确并非最适合于某个特定蛋白质,那么可调整转印条件,以配合蛋白质的生化特性。 [2014/6/6]

  • 蛋白质印迹手册7:影响转印的因素

    影响蛋白质成功转移的因素有哪些?本文提到了四点:SDS的存在、电流和转印时间、转印缓冲液的pH值,以及平衡时间。 [2014/6/5]

  • 蛋白质印迹手册6:转印缓冲液

    转印缓冲液提供了电极之间的电连续性,必须是导电的。它还提供了一个化学环境,能维持蛋白质的溶解度,又不妨碍转移过程中蛋白质吸附到膜上。对于大多数蛋白质样品,常见配方可实现这些功能。至于添加到缓冲液中的甲醇,它有什么功能呢?请看本文。 [2014/5/30]

  • 蛋白质印迹手册5:WB之蛋白转移

    电泳洗脱,或电泳转印是迄今为止使用最广泛的转印方法。与扩散或真空转印相比,主要优点是速度和转移完全。两种常用的电泳转印技术是槽转印和半干转印。它们都基于相同的原理,只是容纳凝胶/膜堆积层所用的机械装置和电场的施加不同。 [2014/5/29]

  • 蛋白质印迹手册4:WB之蛋白分离

    Western印迹包含下列步骤:在聚丙烯酰胺凝胶上分辨一个复杂的蛋白质样品;将分辨好的蛋白质转移到膜上;膜上特定蛋白质的鉴定。本文介绍了SDS-PAGE技术的操作要点和考虑因素。 [2014/5/26]

  • 蛋白质印迹手册3:印迹原理与优化

    过滤是将蛋白质上样到膜上的直接方法。一个溶解的样品可以通过抽真空而滤过膜。蛋白质吸附到膜上,而样品的其他组分则穿过膜。或者,将样品直接点在表面上,并让其干燥。固定在膜上的蛋白质随后可用于分析。 [2014/5/23]

  • 蛋白质印迹手册2:蛋白质结合

    一旦膜被浸湿,蛋白质结合可通过蛋白质与膜的接触而实现。由于蛋白与膜结合的发生贯穿整个膜的厚度(深度),结合能力是由孔的内部表面积来决定的。Immobilon®-P与Immobilon®-PSQ转印膜在蛋白结合能力上有何差异?影响蛋白质结合的因素有哪些?请看本文。 [2014/5/20]

  • 蛋白质印迹手册1:膜的选择

    PVDF膜和NC膜作为Western印迹应用中最常用的两种类型的膜,各有什么特点?我们该如何选择?近四十年来,默克密理博一直是转印膜的领先供应商。它目前提供三种PVDF膜。这三种膜有何不同,分别适合哪些应用呢?详见本文。 [2014/5/19]

  • 《蛋白质印迹手册》第六版上线

    默克密理博公司备受欢迎的《蛋白质印迹手册》(Protein Blotting Handbook)又出新版啦。第六版的手册在优化抗体浓度和降低背景方面增加了更全面的指引,同时扩展了荧光检测的数据和操作步骤,是蛋白质印迹实验不可缺少的好伙伴。即日起,生物通将每天发布《蛋白质印迹手册》的内容,以飨读者。同时,欢迎大家索取印刷版的《蛋白质印迹手册》。 [2014/5/16]

  • C-DiGit个人型化学发光成像仪使用小技巧[心得点评]

    C-DiGit是一款将性能和价格进行完美结合的个人型数码化学发光成像仪,它小巧轻便,价格实惠,操作简便。在此为您介绍使用此款仪器的一些小技巧,以获得更好的使用效果。 [2014/4/2]

  • 定量Western blot中loading control的选择

    随着荧光染料的发展,尤其是近红外荧光染料的出现,传统Western blot步入了定量研究的时代。在定量研究时代,比较研究更加需要稳定表达的内参蛋白,然而常用的loading controls,如肌动蛋白和微管蛋白,在病变组织与正常组织间、不同的正常组织间以及同一组织的不同部位都呈现出差异表达。于是,作者提出了用总蛋白分析(total protein analysis)进行标准化,并验证了它的灵敏度、线性及范围都优于常用的肌动蛋白和微管蛋白,更加满足定量Western blot研究的需求。 [2014/3/21]

  • 从Western Blot实验中解放你的双手[新品推荐]

    Western Blot实验广泛应用于分子生物学、生物化学和免疫遗传学的一种实验方法,传统方法的Western Blot实验整个过程耗时较长,尤其是蛋白转膜后的洗涤和抗体孵育,全程需要实验人员实时守候在仪器旁,且需要耗费数小时或更多的时间。美国Next Advance研发了Freedom Rocker全自动洗膜系统,该系统能自动完成从封闭→洗涤→添加一抗→洗涤→回收一抗→洗涤→添加二抗→回收二抗→洗涤等步骤,将研究人员从冗长的手工劳动中解放出来。 [2014/2/27]

  • 全自动Western blot仪器家族又添新成员[新品推荐]

    如今,ProteinSimple公司又推出一系列新产品,包括高通量以及低成本的Simple Western。Sally Sue(萨莉•苏)让用户能在一次实验中进行96个Simple Western,而Peggy Sue(佩姬•苏)也能够一次分析96个样品,并按照大小或电荷分离蛋白。Wes作为低成本的Simple Western 仪器,能在3小时内分析多达25个样品。 [2014/1/22]

  • Western不再有压力 半天轻松完成[新品推荐]

    最近几年,在Western blot领域,有不少新产品上市,它们能加快实验进程,将我们从繁重的体力劳动中解放出来,还能改善实验结果。下面,就让生物通带你来看看这些“高端大气上档次”的产品,特别是后面两种“神器”,关键时候也许能帮你一把。 [2014/1/16]

  • 让western blotting加速的神器[新品推荐]

    SNAP i.d.® 2.0是一套真空驱动的WB加速器。这个在2013年上市的第二代快速免疫检测小设备,支持您在不损失免疫信号及不降低数据质量的前提下,将Western Blotting封闭至二抗孵育由传统的几个小时缩减至30分钟。 [2013/12/17]

  • 自动化设备让Western blot无压力[新品推荐]

    之前对Western的优化主要集中在转印,时间缩短,效率提高,但之后的封闭、抗体孵育也颇为繁琐,容易出错。iBind™全自动蛋白印迹处理系统将转印之后的步骤自动化,帮助您获得更佳的实验结果。 [2013/11/14]

  • ECL Prime蛋白印迹试剂之使用心得[心得点评]

    Amersham ECL Prime是ECL家族的新成员。它在灵敏度方面至少是ECL plus的两倍,其最低检测限(LOD)达到pg级。此试剂的特点在于大幅增加了信号的稳定性,这使得反复曝光变成可能,并能够在一个实验中轻松地进行多个印迹处理。 [2013/11/11]

  • Bio-Rad全能型蛋白转印系统之使用体会[心得点评]

    两年前,Bio-Rad隆重推出全能型蛋白转印系统(Trans-Blot Turbo),以前所未有的3分钟转印而吸引了众人的目光。Trans-Blot Turbo 转印系统将传统转印技术与现代滤纸以及缓冲液结合一体,能够在最短的制备时间内快速转印蛋白质。它是不是真的这么棒,让我们听听用户的说法。 [2013/11/7]

  • iBlot 7分钟转印,听听用户怎么说[心得点评]

    Life Technologies的iBlot®干式转印系统因7分钟快速转印而受到研究人员的喜爱。自2007年推出以来,已有700多篇文献引用。使用iBlot,无需配制任何缓冲液,只需要5-7分钟就能将蛋白转到NC膜或PVDF膜上。当然,我们还是听听用户的评价吧。 [2013/11/4]

  • C-DiGit化学发光扫描仪之用户体验[心得点评]

    美国LI-COR公司的C-DiGit化学发光扫描仪是一款高性价比的化学发光成像仪,它整合了暗房压片的高灵敏度以及CCD成像仪的灵活、数字化成像优势,让您无需胶片和暗房也能得到灵敏度等同于压片的图像。这款高性价比的仪器在SelectScience网站上获得了4.7分的高分(满分为5分)。下面让我们听听用户怎么说。 [2013/11/1]


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