对于大多数真核生物来说,mRNA 需要 5’ 端带有 7-甲基鸟苷(m7G)帽结构,3’ 端带有 poly(A)尾才能有效翻译。HiScribe™ T7 mRNA 合成试剂盒(含 CleanCap® Reagent AG)优化了 RNA 合成配方,利用三核苷酸帽结构类似物技术,通过一步共转录加帽即可获得带有天然的 Cap-1 结构的 mRNA,且不会影响 RNA 产量。使用含 T7 启动子序列、AG 起始的目标序列和 poly(A)尾编码序列的 DNA 模板,即可转录带有 5’-m7G Cap-1 和 poly(A)尾的 mRNA,该 mRNA 能够有效翻译并能逃避细胞先天免疫反应。

产品优势:

一步完成共转录加帽流程,加帽效率高(加帽产物 > 95%)
使用 CleanCap Reagent AG 三核苷酸帽技术可获得带有天然的 Cap1 结构的 mRNA,极大的提高了翻译效率,减少了自身免疫反应
经优化设计,mRNA 产量高,使用 1 µg 对照模板,单次反应可转录高达 90 µg Cap-1 mRNA
独立包装的 NTP 适用于全部/部分修饰 NTPs 替换


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  比较不同体外转录试剂(无帽结构类似物、ARCA 抗逆转帽 或 CleanCap Reagent AG)的 RNA 产量

所有反应均使用 5 mM CTP、5 mM UTP 和 6 mM ATP 进行。标准 IVT 反应使用 5 mM GTP,不添加帽结构类似物。ARCA 反应使用 4:1 的 ARCA:GTP(4 mM:1 mM)。含 CleanCap Reagent AG 的 IVT 反应使用 5 mM GTP 和 4 mM CleanCap Reagent AG,反应体系分别参照以下说明书配制:标准 mRNA 合成和 HiScribe T7 mRNA合成试剂盒(含 CleanCap Reagent AG))。反应在 37℃下孵育 2 小时,通过 NanoDrop 检测纯度和定量。



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