Invitrogen TransfectionLab 是一款云端应用程序，可以从设计阶段开始，自动生成为每个电转染实验量身定制的分步指南。您可以为多达 384 个样品远程设置多个孔板布局，在应用程序中保存的任何方案或孔板布局都可以在连接的 Neon NxT 系统上直接访问。
使用高效、快速、简单、灵活的紧凑型电转染系统，节省宝贵的研究时间，并保护珍贵的样本。Invitrogen Neon NxT 电转染系统采用专有移液器吸头技术，再结合经过简化的工作流程和灵活操作，有助于减少样本损失，降低污染风险，减少操作步骤，让您全方位管控各种实验。
Neon NxT 电转染系统的优势
- 极高的转染效率和细胞存活率—可转染具有挑战性的细胞株，转染效率高、细胞活率高
- 根据需要灵活变通—针对不同的细胞类型、细胞密度、递送物质和电转染方案，精确优化电转染参数。
- 提高基因编辑效率—优化缓冲液以改进 CRISPR 分子的递送
- 节省宝贵的研究时间—利用一个缓冲液试剂盒和直观的用户界面，通过 3 步简单的工作流程即可快速转染细胞
- 保存珍贵的样本—尽量减少样本输送造成损失和污染的风险
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客户故事
Neon NxT 大学实验室合作伙伴推荐视频
在这段视频中，Neon NxT的大学实验室合作伙伴，教育项目经理 Samantha Renusch 分享了她使用 Neon NxT 电转染系统的经验。
使用该转染系统对多种细胞株进行转染时，均可实现极高的转染效率和细胞存活率
Neon NxT 电转染系统是一款电转仪，在极难转染的细胞（包括免疫细胞、原代细胞和干细胞）中实现高达 90% 的转染和基因编辑效率。150 多个细胞株已在经过优化的即用条件下进行了转染效率和细胞存活率测试。
搜索转染方案和引用数据库，查看适用于不同细胞株的最佳电转染方案。
图1 .Neon NxT 电转染系统的转染效率。 使用 GFP 质粒 DNA 或 GFP mRNA 在 10 μL 或 100 μL 电转染反应液中对细胞进行转染。报告的转染效率为 GFP 阳性细胞的百分比 (n = 3) 注意： 初始 T 细胞仅在 100 μL 反应中进行电转染。
图 2.Neon NxT 系统进行电转染后的细胞存活率。 在使用 GFP 质粒 DNA 或 GFP mRNA 在 10 μL 或 100 μL 电转染反应液中对细胞进行转染。转染细胞使用 Invitrogen SYTO Red 死细胞染色剂染色，并通过 Invitrogen ATTUNE NxT 流式细胞仪评估细胞存活率。报告的细胞存活率 (%) 为 3 次测量的平均值。 注意： 初始 T 细胞仅在 100 μL 反应液中进行电转染。
图 3. Neon NxT 重悬基因编辑缓冲液在基于 CRISPR-Cas9 的基因编辑实验中的性能。. 在 10 μL 或 100 μL 反应中电转细胞。(A) 以 GFP 阳性细胞百分比表示的 GFP 供体 DNA 基因敲入效率。(B) GFP 供体 DNA 敲入后细胞的存活率。(C) 以电转后不表达 GFP 的初始 GFP 阳性细胞百分比表示的基因敲除效率。(D) 电转后基因敲除细胞的存活率。
提高基因编辑效率
基因编辑在进一步了解人类健康和疾病方面大有可为。在基因编辑工作流程中，一个关键而又具有挑战性的步骤是将 CRISPR 核糖核蛋白 (RNP)、DNA 和 RNA 分子有效地递送到所选择的细胞系中，也就是所谓的转染。如上所述，电转是最广泛使用的递送方法，因为它能够实现高转染效率，即使是难以转染的细胞也不例外。
与 Neon NxT 电转染系统配合使用时，我们的基因编辑试剂和 Neon NxT 重悬基因编辑缓冲液可以帮助提高基因编辑性能，使用 CRISPR Cas9 等特定物质进行哺乳动物细胞（包括原代细胞、干细胞和难以转染的细胞）的基因敲除或基因敲入实验 (图 3)。
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为什么 Neon NxT 电转染系统可以很好地替代电转比色皿？
图 3.Neon NxT 移液器吸头相对于标准电转比色皿的优势。 专有的生物兼容型 (A) Neon NxT 吸头展示了成熟可靠的毛细管电转染技术，与(B) 电转比色皿相比具有重要优势。
与标准比色皿电转染腔室不同，Neon NxT 电转染系统使用专有的生物兼容移液器吸头腔，可产生更均匀的电场。这一设计可以更好地维持生理状态，与常规电转染相比，细胞存活率更高。†
- 形成更加均匀的电场
- 在整个电转染腔室内维持稳定的 pH 值
- 产生极少热量
- 生成较少离子
- 减少细胞遇到的剪切力
针对不同的细胞类型、细胞密度、递送物质和电转染方案，精确优化电转染参数
电转染参数可定制
使用 Neon NxT 电转染系统，您可以精确控制对实验至关重要的参数，而不会将宝贵的时间浪费在调整不准确的参数上。您可以利用该转染系统修改以下参数：
- 脉冲电压
- 脉冲宽度
- 脉冲次数
- 细胞类型
- 缓冲液类型
- 递送物质类型
对各种递送物质、细胞类型和细胞密度均可通用
将 DNA、RNA 或蛋白质递送到多种哺乳动物细胞中，每次反应可灵活转染 2 x 10⁴ 至 6 x 10⁶ 个细胞。
使用 TransfectionLab 云端 APP 轻松制定计划
Invitrogen TransfectionLab 是一款云端 APP，可以通过Thermo Fisher Connect平台进行访问，能够根据每个电穿孔实验，从设计阶段开始量身定制分步指南。您可以远程设置多达 384 个样本的多个孔板布局，通过已经连接网络的 Neon NxT 系统，您可以直接访问 APP 中保存的任何方案或孔板布局。
利用一个缓冲液试剂盒和直观的用户界面，通过 3 步简单的工作流程即可快速转染细胞
经简化的电转染工作流程
Neon NxT 电转染系统的工作流程经过简化，易于操作和执行，用户几乎不需要进行培训，提高了结果的一致性和可再现性。
使用该转染系统可轻松完成电转染过程：首先，将细胞和质粒混合物加入 Neon NxT 移液管吸头中。其次，插入移液器架，按下“电穿孔”。最后，将转染细胞转移至培养皿中。由于转染在移液器吸头内进行，所以 3 个简单的步骤即可完成转染操作：吸液、电转染、分液。
| 第 1 步 |
|---|
吸液将细胞悬浮在 Neon NxT 缓冲液中进行制备。将Neon NxT 缓冲液中悬浮培养的细胞和递送物质混合物加入 Neon NxT 移液器吸头中。 |
| 第 2 步 |
电转染 向细胞施加电脉冲，递送专用缓冲液中的递送物质。
|
| 第 3 步 |
分液复原细胞生长条件，使转染细胞恢复。 |
| 第 4 步 |
分析细胞 对基因表达、基因组编辑、基因沉默和细胞株生长进行评估
|
该电转染系统能够缩短处理时间
除了简化工作流程外，与常规电转染系统相比，我们专有的电转染技术可将总处理时间缩短至 10-15 分钟，因为转染在 Neon NxT 移液器吸头内进行。
一个缓冲液试剂盒即可用于多种哺乳动物细胞类型
解决了根据细胞株寻找缓冲液试剂盒的问题。我们使用一个缓冲液试剂盒简化了这一过程，该试剂盒可适配 150 多个哺乳动物细胞株。我们建议使用电压低于 1,900 V 的 Invitrogen Neon NxT 重悬缓冲液 R 和电压较高的 Invitrogen Neon NxT 重悬缓冲液 T。
节省时间的孔板设置
使用 Neon NxT 电转染系统的直观用户界面，提前设置整个孔板，而不用“快速启动 (Quick Start)”功能调整不同样本之间的电转参数。在每个样本进行电转染时，可监测屏幕上的进展情况，在 20 分钟内最多可完成 24 个样本的电转染。
利用电转仪独特且紧凑的设计，可以尽量减少样本输送造成的损失和珍贵细胞污染的风险。
最大限度减少样本输送造成的损失
样本固然珍贵，但在常规电转比色皿的来往移液过程中难免出现损失。Neon NxT 电转染系统中的电转染工艺流程在移液器吸头内进行，有利于尽量减少样本损失以及细胞遇到的剪切力。
最大限度减少样本污染
Neon NxT 系统（包括脉冲发生器和移液器工作站）占地面积小，适合大多数生物安全柜 (BSC)。使用该仪器时，样本始终位于无菌区，有利于降低珍贵样本的污染风险。Neon NxT 系统还新增了一项电缆管理功能，确保该仪器可更加适配在 BSC 中的使用。
图 4.Neon NxT 电转染系统的尺寸。Neon NxT 脉冲发生器（宽 24.1 厘米，高 19.3 厘米，深 25.1 厘米）和 Neon NxT 移液器工作站（宽 12.2 厘米，高 29.2 厘米，深 15.0 厘米）适合大多数 BSC，有利于最大限度地减少样本污染。
Neon NxT 电转染系统和 Neon 转染系统的规格比较
| 规格 |  Neon NxT 电转染系统 |
 Neon 转染系统 |
|---|---|---|
| 电转体积 | 10 µL 或 100 µL | 10 µL 或 100 µL |
| 电转缓冲液体积* | 2 mL | 3 mL |
| 吸头连接技术 | ClipTip 技术 | 摩擦 |
| 电脉冲 | 1-10 | 1-10 |
| 脉冲持续时间 | 1-100 ms | 1-100 ms |
| 脉冲电压 | 500-2,500 V | 500-2,500 V |
| 电弧检测 | 是 | 否 |
| 云连接 | 是 | 否 |
| 脉冲发生器尺寸** | 24.1 x 19.3 x 25.1 厘米（宽度x高度x深度） 11.5.4 kg |
24.1 x 22.6 x 34.5 厘米（宽度x高度x深度） 13.6.25 kg |
| 电缆管理功能*** | 是 | 否 |
| 触摸显示屏 | 8 英寸电容触摸屏 | 7 英寸触摸屏 |
| 电源额定值 | 100-240 VAC，270 W | 100-240 C，150 W |
* Neon NxT 电转染系统的缓冲液管配有 2 mL 液位指示器。
** Neon NxT
脉冲发生器可在不移动窗口的情况下从常规 BSC 中出入。
*** 多余电缆可使用方便安装的电缆架固定在 Neon NxT
系统后部。
与 Neon 转染系统的性能相同
图 5.Neon NxT 电转染系统和 Neon 转染系统的性能。性能评估通过使用 GFP 质粒 DNA 或 GFP mRNA 转染不同的哺乳动物细胞株来进行。(A) 报告的 GFP 质粒 DNA 转染效率为 GFP 阳性细胞的百分比。(B) 使用 GFP 质粒 DNA 转染后的细胞存活率。(C) 报告的 GFP mRNA 转染效率为 GFP 阳性细胞的百分比。(D) 使用 GFP mRNA 转染后的细胞存活率。
† Kim JA, Cho K, Shin MS, et al.(2008) A novel electroporation method using a capillary and wire-type electrode. Biosens Bioelectron 23(9):1353–1360.
相关资源
文件
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