专为全基因组打造:无偏好的全面覆盖
Twist PCR-Free 全基因组测序文库制备试剂盒旨在无需扩增的情况下,生成高质量的全基因组文库,从而保留基因组的原始特征。该试剂盒基于 Twist 优化后的酶切片段化及连接化学,其工作流程可提供大小一致的插入片段、低连接偏好以及全基因组范围内的均一覆盖,确保准确的变异分析。

降低基因组的AT dropout 效应

PCR-Free 的文库制备保留基因组的原始特征,降低AT 相关的 dropout,并提升挑战性区域的覆盖均一性。

专为规模化工作流程而构建

Twist全长UDI接头性能优异,多达1536种。

转化最大化,偏好最小化

最小化的连接偏好和提高的转化效率保留了真实的基因组表现,并从每个样本中生成更多可用的测序片段数

产品数据

  • 低起始样本量仍可获得稳定产量
    Twist PCR-Free全基因组测序文库制备方法即使在 DNA 起始量减少的情况下,也能提供稳定的文库产量和一致的文库大小。其特有的连接酶化学技术可实现高效、均一的连接,从而有助于在不同的起始量下获得可用于测序的文库。
  • 不同起始量下插入片段大小一致
    Twist PCR-Free 全基因组测序文库制备方法可在 37.5 ng 至 300 ng DNA 的起始量范围内保持稳定的插入片段大小(中位值)。不同样本均可保持最小的测序片段间(read1和read2间)重叠,这样确保了高效的测序和可靠的全基因组覆盖。
  • 可控的片段长度,实现更高效的测序
    Twist TrueAmp 文库制备试剂盒可生成不同插入片段大小的文库。通过调节片段化时间,可适配不同测序需求。
  • 最小的GC偏好,实现均一覆盖
    对于不同DNA起始量,Twist PCR-Free全基因组文库制备方法都能在不同GC含量情况下保持一致且均一的覆盖。

图 1.不同起始量下PCR -Free文库产量的比较。使用所示 DNA 起始量进行无 PCR 文库制备后,测量最终文库浓度 (nM)。在相同起始量下,Twist PCR -Free全基因组测序文库制备方法比其他方法获得更高的文库产量,并且在较低起始量下也保持了良好的性能。

图 2. 该试剂盒在广泛的 DNA 样本范围内可生成一致的长插入片段。(A) 展示了以NA12878 基因组 DNA 300 ng、75 ng和37.5 ng 为起始量的中位插入片段大小。(B) 展示了 300 ng、75 ng 和 37.5 ng 的NA12878 样本起始量的重叠(Read1和Read2的重叠)百分比(衡量双端测序测序片段冗余覆盖相同 DNA 碱基的程度)。

图 3. Twist PCR-Free全基因组测序文库制备试剂盒的可调性

A:不同片段化时间生成的NGS文库5张电泳图。 50 ng高质量gDNA在 32°C 下进行不同时长的片段化。

图 4. Twist PCR-Free 全基因组测序文库制备试剂盒在不同 GC 含量下提供更一致且均一的覆盖度分布。该试剂盒即使在低起始量下也能将 GC 偏好控制在较低水平,无需额外测序即可获得均一覆盖,提升高 GC 与低 GC 含量区域的变异检出能力。

Twist PCR-Free 全基因组测序 文库制备试剂盒 产品彩页

Twist PCR-Free 全基因组测序 文库制备试剂盒 操作手册