基因敲除细胞株

  • 活动时间:2023年3月10日——4月10日
  • 活动内容:订购特价细胞的基因敲除项目即享1.75万的优惠价格。
细胞株所属领域 细胞名称 中文名称 订购
骨骼血液系统 A-673 人横纹肌肉瘤细胞
Clone E6-1 人白血病T淋巴细胞
Jurkat 人白血病T淋巴细胞
K-562 人慢性髓系白血病细胞
RAW 264.7 小鼠单核巨噬细胞白血病细胞
SW1353 人软骨肉瘤细胞
呼吸系统 A549 人非小细胞肺癌细胞
BEAS-2B 人正常肺上皮细胞
HCC827 人非小细胞肺癌细胞
MH-S 小鼠肺泡巨噬细胞
NCI-H1299 人非小细胞肺癌细胞
NCI-H1975 人肺癌细胞
SK-MES-1 人肺鳞癌细胞
泌尿系统 ACHN 人肾癌细胞
BHK-21 仓鼠肾成纤维细胞
HEK293 人胚肾细胞
HEK293-A 人胚肾上皮细胞
HEK293T 人胚肾细胞
HK-2 人肾近曲小管细胞
NRK-52E 大鼠肾小管上皮细胞
Vero 非洲绿猴肾细胞
皮肤系统 A2780 人卵巢癌细胞
B16 小鼠黑色素瘤细胞
B16-F10 小鼠黑色素瘤细胞
HaCat 人永生化表皮细胞
神经系统 BV-2 小鼠小胶质细胞
HT22 小鼠海马神经元细胞
T98G 人脑胶质瘤细胞
生殖系统 4T1 小鼠乳腺癌细胞
CHO-K1(贴壁) 仓鼠卵巢细胞亚株
DU 145 人前列腺癌细胞
Hela 人宫颈癌细胞
IoSE-80 人卵巢癌细胞
ishikawa 人子宫内膜癌细胞
KGN 卵巢颗粒细胞
PC-3 人前列腺癌细胞
SK-OV-3 人卵巢癌细胞
消化系统 AML12 小鼠正常肝细胞
CAL-27 人舌鳞癌细胞
CT26.WT 小鼠结肠癌细胞
DLD-1 人结直肠腺癌上皮细胞
H-4-II-E 大鼠肝细胞瘤
HCT 116 人结肠癌细胞
HCT-15 人结直肠腺癌细胞
Hep G2 人肝癌细胞
Hep3B 人肝癌细胞
HGC-27 人胃癌细胞
MC38 小鼠结肠癌细胞
MGC-803 人胃癌细胞
PANC02 小鼠胰腺癌细胞
PANC-1 人胰腺癌细胞
RKO 人结肠癌细胞
其他 3T3-L1 小鼠胚胎成纤维细胞
AC16 人心肌细胞
HEI-OC1 小鼠耳蜗毛细胞

 

基因敲除细胞株服务介绍

作为实现基因功能缺失的重要调控方式,基因敲除(Knock out, KO)可完全消除目的基因的表达,使其蛋白完全不表达或功能彻底丧失,且可以更好地观察细胞表型的变化。但KO细胞株构建过程较为繁琐,实验周期长,且容易出现敲除效果不彻底的情况,导致研究进度受阻。

基于Smart-CRISPR™细胞基因编辑系统,赛业生物新升级的KO细胞株构建服务,可轻松实现快至4周交付。我们使用优化的转染体系将RNP(gRNA和Cas9蛋白复合物)直接递送到细胞内,相比于质粒和病毒等CRISPR/Cas9介导的方法,脱靶效率降低明显,能更精准地切割目标DNA序列。

 

服务特色

  • 超200种成功案例细胞
类型 典型细胞株 交付标准 质控
肿瘤免疫细胞
Jurkat, HepG2, SK-MES-1等 1个单克隆纯合子细胞株2管(106/管),实验报告 PCR+Sanger测序等
非癌永生化细胞
HK-2, AC16等 1个单克隆纯合子细胞株2管(106/管),实验报告 PCR+Sanger测序等
诱导多能干细胞
iPSC 1个单克隆纯合子细胞株2管(106/管),实验报告 PCR+Sanger测序+免疫荧光等
干细胞
H1, H9 1个单克隆纯合子细胞株2管(106/管),实验报告 PCR+Sanger测序+免疫荧光等

 

  • 多种敲除策略

我们具备移码突变、片段敲除、多基因敲除等编辑技术能力,根据研究项目的基因和细胞信息的不同,采取最佳方案,极大提高目的基因敲除的成功率和蛋白的不表达效率。

  • 优化实验流程,有效提升编辑效率

基因/细胞分析→sgRNA设计与合成→细胞电转及KO效果鉴定→单克隆化→测序分析→复检及扩增

 

体内体外基因编辑平台优势

  • 采用RNP递送,脱靶效率低

相比于质粒或者病毒等基因敲除方法,RNP递送具有更高的特异性和编辑效率,准确靶向目的细胞,实现Cell pool/纯合子交付,快至4周。

  • 独创Smart-CRISPR™技术

拥有全新升级的Smart-CRISPR™细胞基因编辑系统,轻松实现基因敲除、基因敲入等多种策略,编辑效率高达90%。

  • 成熟的技术平台

从体内动物实验到体外细胞实验,拥有上万例成功基因编辑项目经验、超200种细胞株成功案例和多篇文献引用发表,可提供从细胞基因表达调控、细胞功能验证、小鼠疾病模型构建及表型分析的全流程服务。

  • 严格的质量控制体系

进行细菌、支原体等微生物的双重检测,确保100%无污染,并充分鉴定基因编辑效果;进行细胞活率检测,保证交付质量。

  • 专业的项目管理

24h内即可出方案,定期反馈项目进展,配备博士团队予以技术支持,提供详尽的交付报告,可根据要求交付不同克隆(纯合子、杂合子和对照)细胞。

 

服务案例

  • 体外敲除HIF-1α基因以验证其调控机制

Di-(2-ethylhexyl) phthalate exposure leads to ferroptosis via the HIF-1α/HO-1 signaling pathway in mouse testes.

研究人员构建了HIF-1α基因敲除的Leydig和Sertoli细胞系,通过Sanger测序和Western blotting检测,确认了敲除细胞系中的HIF-1α被成功敲除。与野生型细胞相比,HIF-1α-KO细胞系在MEHP刺激下细胞活力受损的程度有明显改善。同时,脂质过氧化和亚铁超载也受到抑制。分别使用qPCR和Western印迹法评估Hmox1和HO-1水平的表达,发现敲除Hif-1α能逆转MEHP刺激下的Hmox1和HO-1表达水平上调。此外,MEHP刺激后ROS爆发和细胞死亡程度也在敲除HIF-1α后减弱。Western印迹显示敲除HIF-1α恢复了ACSL4、FTH1和SLC7A11的表达,以及抑制GPX4的表达。由此表明,MEHP刺激以HIF-1α依赖的方式导致睾丸Leydig和Sertoli细胞的铁死亡。

 

 

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