基因编辑细胞系常见问题解答
为你提供基因敲除、敲入、点突变等多类型细胞系构建的实验干货，随查随用
基因敲除（Knock out, KO）细胞在疾病基础研究和药物开发中应用广泛，但其构建过程较为繁琐，实验周期长，且可能由于sgRNA切割效率过低、存在混杂细胞等原因，导致难以筛选出单克隆纯合子；即使测序鉴定为纯合子，WB检测环节仍时常发现有蛋白残留现象。别再让这些困扰成为你科研路上的绊脚石，快来了解一下赛业生物的KO细胞株构建服务吧！
基于Smart-CRISPR™细胞基因编辑系统，我们能实现单克隆纯合子交付，快至1周。通过使用优化的转染体系将RNP直接递送到细胞内，脱靶效率降低明显；更有罕见病数据中心（RDDC）开发的RNA剪接模型工具提供支持，辅助筛选ORF移码的单克隆，助力挑选WB阴性克隆。现在下单，可享受低至6980元的优惠价格，欢迎拨打400-680-8038或邮件至info@cyagen.com联系我们。
基因敲除细胞服务项目
现货KO细胞库，交付单克隆纯合子，快至1周，低至6980元
定制KO细胞服务，交付单克隆纯合子，快至30个工作日，低至1.2万元
活动时间：2023年9月18日 — 12月31日
| 类型 | 典型细胞株 | 交付标准 | 质控 | 订购 |
|---|---|---|---|---|
| 肿瘤免疫细胞 | Jurkat, HepG2, Hela, SK-MES-1等 | 1个单克隆纯合子细胞株2管（106/管），实验报告 | PCR+Sanger测序等 | |
| 非癌永生化细胞 | BEAS-2B, HEK293, HSF, HK-2, AC16等 | PCR+Sanger测序等 | ||
| 诱导多能干细胞 | iPSC | PCR+Sanger测序+免疫荧光等 | ||
| 干细胞 | H1, H9 | PCR+Sanger测序+免疫荧光等 |
超300种成功案例细胞 
神经系统
呼吸系统
循环(心血管)系统
消化系统
生殖系统
泌尿系统
运动(肌肉)系统
内分泌系统
免疫系统
强大的算法赋能细胞基因编辑项目
AI辅助筛选Western Blot
阴性单克隆
阴性单克隆
Smart-CRISPR™细胞基因
编辑系统辅助方案设计
编辑系统辅助方案设计
借助罕见病数据中心（RDDC）开发的RNA剪接模型工具，预测碱基序列突变后mRNA序列可能发生的剪切情况，辅助筛选ORF移码的单克隆，更好地规避在Western Blot环节检测出蛋白残留的风险。
RDDC分析目标克隆在gRNA位点插入4bp后产生选择性剪切识别位点，形成新的截短转录本，Western Blot检测到截短的蛋白，与RDDC预测结果一致。
RDDC分析目标克隆在gRNA位点插入1bp未产生选择性剪切识别位点，产生移码突变和提前终止，Western Blot检测蛋白为阴性，与RDDC预测结果一致。
基于独创的Smart-CRISPR™技术，用户只需在系统中输入需要敲除的基因信息，即可得到自动化生成的方案设计，轻松实现基因敲除、基因敲入等多种策略，编辑效率高达90%。
Smart-CRISPR™细胞基因编辑系统
服务优势
成熟基因编辑技术平台
从体内动物实验到体外细胞实验，拥有上万例成功基因编辑项目经验，可提供从细胞基因表达调控、细胞功能验证、小鼠疾病模型构建及表型分析的全流程服务。
强大的AI算法赋能
由罕见病数据中心（RDDC）开发的RNA剪接模型工具提供支持，辅助筛选WB阴性克隆；基于Smart-CRISPR™细胞基因编辑系统，轻松实现基因敲除、基因敲入等多种策略，编辑效率高达90%。
规模庞大、品种齐全的科研细胞库
我们建设了有各项参数明确、性能稳定的科研细胞库，极大程度规避了基因编辑对细胞的负面影响，目前已拥有超300种靶细胞、1500株以上细胞株成功案例和多篇文献引用发表。
采用RNP递送，脱靶效率低
相比于质粒或者病毒等基因敲除方法，RNP递送具有更高的特异性和编辑效率，新升级递送KO效率近100%，转染效率和活率>80%。
服务案例 — THP-1基因敲除
Di-(2-ethylhexyl) phthalate exposure leads to ferroptosis via the
HIF-1α/HO-1 signaling pathway in msouse testes.
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研究人员构建了HIF-1α基因敲除的Leydig和Sertoli细胞系（由赛业生物提供），通过Sanger测序和Western blotting检测，确认了敲除细胞系中的HIF-1α被成功敲除。与野生型细胞相比，HIF-1α-KO的细胞系在MEHP刺激下细胞活力受损的程度有明显改善。同时，脂质过氧化和亚铁超载也受到抑制。分别使用qPCR和Western印迹法评估Hmox1和HO-1水平的表达，发现敲除Hif-1α能逆转MEHP刺激下的Hmox1和HO-1表达水平上调。此外，MEHP刺激后ROS爆发和细胞死亡程度也在敲除HIF-1α后减弱。Western印迹显示敲除HIF-1α恢复了ACSL4、FTH1和SLC7A11的表达，以及抑制GPX4的表达。由此表明，MEHP刺激以HIF-1α依赖的方式导致睾丸Leydig和Sertoli细胞的铁死亡。
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