图4. Rapid Response^TM报告体在CHO细胞及NIH3T3 细胞中的表达。用hlucP+, hlucCP+, hRluc, hRlucP 或hRlucCP报告基因取代pGL3-对照载体(E1741)中的luc+基因。用取代后的载体及pGL3-对照载体与一个第二报告体（转化对照）共转化CHO细胞或NIH3T3 细胞。图A及图B中的转化对照分别为phRL-TK (E6241)及pGL3-对照载体(E1741)。转化后24小时，用被动裂解缓冲液(E1941)收集细胞，并用Dual-Luciferase(r) 报告检测系统(E1910)确定相对光强度。用转化对照校正相对光强度。降解序列对荧光素酶积累的作用效果以对照的百分比来表示。图A. CHO及NIH3T3转化细胞中hlucP+及hlucCP+与luc+（pGL3-对照载体）相比的表达百分比。图B. CHO及NIH3T3转化细胞中hRlucP及hRlucCP与hRluc相比的表达百分比。

结论
    通过加入蛋白或蛋白与mRNA降解序列使萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶报告体的稳定性降低，然后利用它们组成Rapid Response^TM 报告载体。这些去稳定报告体反应迅速并对转录速率的变化有很强的放大作用。Rapid Response^TM 报告载体快速的反应速度使其能够对瞬间细胞内事件做出反应，并降低了次级事件干扰实验结果的风险。快速的反应速度使得在筛选应用中高通量检测成为可能。这些改进并不影响与报告体表达相关的生理条件。

图5. Rapid Response^TM 报告体的药理学类似物的比较图。用含有CRE、neo、和或者hluc+、hlucP+或者hlucP+的载体建立HEK293稳定表达细胞系。将细胞接种于96孔板中并用不同浓度的异丙肾上腺素（ISO）培养2，4及6小时。对照孔未处理。培养后，用Bright-Glo^TM荧光素酶检测系统(E2610)测定荧光素酶的活性。图中的线段代表所有3次数据的平均值。

参考文献
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6. Li, X. et al. (1998) J. Biol. Chem. 273, 34790-5.

操作手册
● Rapid Response^TM 报告载体操作手册#TM242, Promega公司。 （http://www.promega.com/tbs/tm242/tm242/html）