| 表1. Butyl-S Sepharose 6 Fast Flow的一般特征
| 基架 |
6%高交联琼脂糖 |
| 配基类型 |
空间连接臂Butyl-S:-S (CH2)3 - CH3 |
| 颗粒形式 |
刚性,球状,大孔 |
| 平均颗粒大小 |
90 mm直径 |
| 粒度分布 |
45-165 mm |
| 配基密度 |
8.9-11.3 mmole配基/ml介质 |
pH 稳定性
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工作范围
清洗范围 |
3-13
2-14 |
| 化学稳定性 |
在常用的水溶液缓冲液中稳定:
1 M HCl,1 M NaOH,30%异丙醇,50%乙二醇,70%乙醇,3 M硫酸钠,6 M盐酸胍,8 M脲
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| 高压灭菌 |
0.05 M磷酸钠缓冲液,pH 7.0 121℃,20 min |
| 流速,在25℃,0.1 M |
大约400 cm/h,1 bar (100 kpa,14.5 |
| NaCl 流动相 |
psi),柱XK 50/30,床高15 cm |
| 操作温度 |
4-40℃ |
在图1中比较了Butyl-S Sepharose 6 Fast Flow与Butyl Sepharose
4 Fast Flow 的选择性。
柱: 尺寸10 mm x 10 cm,装床体积= 5.9 ml
缓冲液A: 0.02 Tris-HCl, 1.7 M 硫酸铵pH 7.5
缓冲液B: 0.02 Tris-HCl, pH 7.5
流速: 1 ml/min (76 cm/h)
梯度: 0-100% B , 10 CV
系统: ÄKTAFPLC™ |

图1. 比较了Butyl-S Sepharose 4 Fast Flow (红线) 和
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Butyl Sepharose 6 Fast Flow (兰线) 分离四个蛋白样品,洗脱的次序为: 细胞色素C,RNAase A,溶菌酶和a -胰凝乳蛋白酶原。
图2 比较了各种Sepharose HIC 的选择性,Butyl-S-Sepharose Fast Flow 6 为最弱的疏水介质,Phenyl-Sepharose 6 Fast Flow (高取代) 为最强的疏水介质。
柱: 尺寸10 mm x 10 cm,装床体积= 5.9 ml
缓冲液A: 0.02 Tris-HCl, 1.7 M 硫酸铵pH 7.5
缓冲液B: 0.02 Tris-HCl, pH 7.5
流速: 1 ml/min (76 cm/h)
梯度: 0-100% B , 10 CV
系统: AKTAFPLC™ |

图2. 用Sepharose HIC进行选择性和分辨力的筛选。样品洗脱次序:细胞色素C,RNAase A,溶菌酶和α-胰凝乳蛋白酶原。Butyl-S Sepharose 6 Fast Flow是GE Healthcare生产的最弱疏水性介质,最适用于疏水性强的分子的纯化,如单抗,回收率高并且减少蛋白变性的危险。
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