概 要
本文向您介绍PureYield™质粒中提系统。本系统为快速分离高纯度的质粒DNA而设计，提取的质粒DNA应用于转染、体外表达、自动荧光DNA测序等实验。新的PureYield™纯化柱的独特设计能够在30分钟内得到100-200ug
质粒DNA，使DNA在浓缩的体积中洗脱，避免了过去所需的乙醇沉淀步骤。另一种裂解纯化方法能够使DNA的纯化量达到400ug。PureYield纯化系统与其它的质粒中提系统相比，能够使你节约3个半小时的时间，从而让研究者们集中于更富挑战性的工作上。
PureYield™质粒纯化系统快速纯化中量质粒DNA,使您有更多时间开展有挑战性的工作 |
产品介绍
当研究从DNA测序转移到蛋白表达分析时，我们需要一个能够快速地分离数百微克高质量的质粒DNA的纯化方法来满足我们在真核细胞转染和体外表达实验的需要。而PureYield™质粒中提系统正是能够快速分离中等规模的质粒DNA的系统，让你能够将时间花在更有挑战性的工作上。
本系统提供了一种快速、简便的技术应用新开发的二氧化硅膜纯化柱技术，在30分钟内从大肠杆菌中提取出100-200ug高纯度的质粒DNA。与树脂或其它的膜纯化柱相比，极大的减少了质粒的提取纯化时间。
PureYield™质粒中提系统同时也整和了独特的内毒素清洗步骤，能够清除内毒素、蛋白和RNA污染，从而避免了这些污染可能干扰一些高敏感度实验的可能，比如真核转染实验和TNT®体外转录与翻译实验等。本系统纯化不需要异丙酮沉淀DNA和大量的高速离心步骤，以快速、简便的方法提供高浓度、纯化的质粒DNA。
实验步骤
PureYield™质粒中提系统与其它系统相比，显著缩短提取时间提供纯化的质粒DNA（图1）。例如，PureYield™中的裂解清洗液和DNA结合纯化柱具有高透过率特性，避免了提取纯化中的高速离心步骤。
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图1：同类产品所需时间比较各产品使用各自说明书中的标准提取方法，用50ml过夜培养的转化了高拷贝质粒(pGEM®-3)的JM109大肠杆菌提取质粒。PureYield™中提系统使用了真空负压提取纯化法。各产品的提取总时间如图所示。
PureYield™中提系统使用低速、吊篮离心法、真空负压法、或二者相结合的方法从大肠杆菌中提取纯化质粒DNA，在提取方法上提供了最大限度的便利。您可以根据身边现有的仪器设备，权衡所需质粒的量和花费的时间、以及菌液量的多少，合理剪裁本系统所提供的提取纯化方法来满足你的需要。真空负压法快于低速离心法，但在生物通量（如培养体积或细胞数量）多的情况下，离心法能更有效的清除裂解物。而真空负压与低速离心相结合的方法在DNA结合阶段具有真空负压法的快速特性，而在裂解物清洗阶段具有低速离心法更有效清除裂解物的优点。在低生物量的样品中，这3种方法都能使你得到高质量的质粒DNA以及相似的产量（图2）。
图2：PureYield™中提系统3种质粒提取纯化方法产量的比较
含有pGEM®载体的JM109大肠杆菌培养物用PureYield™中提系统中3种质粒提取纯化方法分别提取。用260nm光波的吸光度计算质粒产量。
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