创新参选:如何使接种细胞后细胞分布均匀

【字体: 时间:2013年01月06日 来源:生物通

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  细胞生物学实验中经常需要给细胞传代或种细胞进行某项实验,但经常会出现消化细胞种板,细胞贴壁后分布不均匀。 如果目的是传代,则密度大的区域生长太快,很快又必须再次传代,费时费力还使得细胞代数快速增加。

  

“赛默飞之生物通2012实验室创新技术大奖”评选活动开展以来,生物通已经陆陆续续收到不少项目,这些项目中有的能减少实验步骤,有的能降低实验成本,还有一些改进了实验设备,让我们的实验过程更加轻松。
生物通将会陆续公布一些项目,以便大家分享这些创新技术。同时为了感谢这些分享实验技巧的参选者,生物通也准备了一些精美礼品寄出,同时近期我们还将进行第二轮抽奖,以飨读者。

 

参选项目:如何使接种细胞后细胞分布均匀

背景:细胞生物学实验中经常需要给细胞传代或种细胞进行某项实验,但经常会出现消化细胞种板,细胞贴壁后分布不均匀。 如果目的是传代,则密度大的区域生长太快,很快又必须再次传代,费时费力还使得细胞代数快速增加。 如果目的是实验前种板,则直接对后续转染,加药,siRNA,miRNA,细胞计数等实验结果产生影响。

方法改进:我们有简单方便的办法将细胞种板均匀,成功率可接近100%。

方法如下:将细胞悬液加入培养皿或培养瓶以后,稍微前后左右振摇几次,转入CO2培养箱后将培养皿平放在培养箱内的架层上,前后左右振摇10-20次。

Tip1:气泡会对细胞分布有影响,所以尽量将培养基上面的气泡吸干净。
Tip2:关于此操作原理,本人认为是传统方法中细胞虽然在操作台上分布均匀了,但转入CO2培养箱过程中因为手抖动,细胞会向某些地方汇集,而本方法则解决此问题。
Tip3:此操作不要有中断,因为静置后培养皿内细胞会迅速从悬浮状态变为沉底状态(1-2min),此时再进行培养箱内振摇操作效果会打折扣。

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