新品∣选你所选,Lenti-X包装系统让病毒包装更灵活

【字体: 时间:2022年07月14日 来源:Takara

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  对于有定制化需求的学霸们,以往的病毒包装系统不便于使用,特别是对于不同SARS-CoV-2变异株的研究应有诸多不便。那么,Takara Bio本期新品可充分满足您的定制化需求。

Takara Bio又又又上新啦!

我们在助力科研的道路上,初心不改步履不停。

在新产品隆重亮相之前,请允许我们对2类重组病毒类型进行简单介绍。

No.1是重组慢病毒。

重组慢病毒是目前基因功能研究的常用载体之一,在生命科学研究领域,作为向目标细胞导入外源基因的有力工具已经被广泛应用。这不仅仅体现在生命科学基础研究领域,在近年来备受关注的肿瘤免疫治疗研究中,慢病毒亦被作为主要的基因导入平台使用。

No.2是重组SARS-CoV-2假病毒。

随着新冠疫情的爆发,COVID-19疗法开发势在必行。由于处理真正的SARS-CoV-2病毒需要更为严苛的安全条件,因此,出于安全性考虑,重组SARS-CoV-2假病毒被用于COVID-19疗法开发研究,如新冠疫苗开发研究、抗体药物开发研究等等。

重组慢病毒的获得需要通过瞬时转染编码病毒成分的质粒至包装细胞来制备,包括编码目标基因的转移载体,编码附着于靶细胞的病毒颗粒表面蛋白质的包膜蛋白表达载体,编码包装病毒基因组和促进转导蛋白质的包装载体。SARS-CoV-2假病毒的包装制备,可借助现有的慢病毒包装系统,把慢病毒包装系统中的包膜蛋白表达载体替换成为刺突蛋白表达载体,包装制备出SARS-CoV-2假病毒。

大多数的包装系统,为方便使用,在包膜蛋白表达载体上固定了特定类型的包膜蛋白,如慢病毒包膜蛋白类型VSV-G,SARS-CoV-2假病毒包膜蛋白类型野生型刺突蛋白等。对于有定制化需求的学霸们,这样的包装系统不便于使用,特别是对于不同SARS-CoV-2变异株的研究应有诸多不便。那么,Takara Bio本期新品可充分满足您的定制化需求。

>>本期新品

新品1:Lenti-X SARS-CoV-2 Packaging Single Shots (Universal)

研究SARS-CoV-2变异株D614G、B.1.1.7或者B.1.351,选它!

★ 功能:包装制备慢病毒or SARS-CoV-2假病毒
★ 特点:可根据需求选择任意包膜蛋白或者刺突蛋白类型,同时提供3种SARS-CoV-2刺突蛋白变体质粒模板(截短的D614G、B.1.1.7和B.1.351),制备SARS-CoV-2假病毒更方便
★ 优势:满足定制化需求,不受固定类型限制

新品2:Lenti-X Packaging Single Shots (Envelope-Free)

不确定研究类型,慢病毒或者其它SARS-CoV-2变异株,选它!

★ 功能:包装制备慢病毒or SARS-CoV-2假病毒
★ 特点:可根据需求选择任意包膜蛋白或者刺突蛋白类型,不提供包膜蛋白或者刺突蛋白质粒模板,需自行获取并克隆至指定载体中
★ 优势:满足定制化需求,不受固定类型限制

★上表所列试剂盒组分不单独销售。

>>新品优势

按需选择,满足定制化需求

我们提供专用载体pEmpty Vector,研究人员可以根据实验需求克隆和表达相应的包膜蛋白或者刺突蛋白,不受限于固定包膜蛋白或者刺突蛋白类型。为方便使用,在Lenti-X SARS-CoV-2 Packaging Single Shots (Universal)中包含了分别编码截短的SARS-CoV-2刺突蛋白变体D614G、B.1.1.7和B.1.351的三个质粒,可以作为模板使用。使用提供的刺突蛋白变体序列作为模板和pEmpty载体,通过简便的一步In-Fusion Snap Assembly反应可以轻松构建所需要的SARS-CoV-2刺突蛋白变体。

先进包装技术,高滴度和高安全性

Takara Bio的包装系统基于第四代慢病毒包装技术,提供高滴度和高生物安全性。目前市面上主要是第三代和第四代慢病毒包装系统。Takara Bio的第四代慢病毒包装系统很有技术亮点。这款包装系统中Tet-Off和Tat反式激活因子驱动病毒必需成分高水平表达,诱导级联表达反应,从而可以制备出高滴度病毒。另外, pol 基因与 vpr 基因的融合可以确保反转录酶/整合酶蛋白质能够转运到重组慢病毒颗粒中。而在第三代慢病毒包装系统中,通常 gag 和 pol 序列是不分离的,也没有使用反式激活级联机制。这款包装系统采用了预混冻干粉形式,使用方便,还在很大程度上可降低操作误差。

使用友好度Up Up Up

在病毒制备过程中,优化转染试剂和质粒配比是一个耗时的步骤。Takara Bio的包装系统采用了单管、预混冻干形式,每管中包含Xfect转染试剂和配比经过优化的Lenti-X慢病毒包装质粒混合物。只需要添加克隆了包膜蛋白或者刺突蛋白的载体和目标基因表达载体,就可以制备病毒了,无需优化。对于研究人员来说,一管一个反应,不需要再额外添加转染试剂,操作简便,同时在很大程度上还可以降低操作误差。

实验效果好评:高效转导ACE2-阳性细胞

使用Lenti-X Packaging Single Shots (Universal)制备表达截短的B.1.1.7 SARS-CoV-2刺突蛋白,同时也表达ZsGreen1绿色荧光蛋白质(Panel A)或者萤火虫荧光素酶(Panel B)的假慢病毒粒子。使用浓缩后的病毒上清液转导稳定表达人ACE2受体的HEK293T细胞,转导后6天通过流式细胞术测定每个样品的转导效率或者发光值。检测结果显示,所制备的SARS-CoV-2假病毒能高效转导ACE2-阳性细胞。

对于肿瘤治疗,慢病毒是目前强有力的主流研究工具;对于COVID-19对抗,SARS-CoV-2假病毒一直并仍然是不可或缺的研究工具。Takara Bio新推出这两款包装系统可以安全、快速并且非常灵活地制备病毒,从而获得高质量、高滴度的病毒,用于相关基础研究、肿瘤治疗或者COVID-19疗法研究。

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