三维脱细胞人羊膜支架：结构、处理与生物学特性

本研究为解决脱细胞人羊膜(dHAM)在降低免疫排斥同时可能削弱再生潜力的问题，研究人员探索了利用脂肪间充质干细胞(AdMSCs)通过新型3D接种技术进行再细胞化的策略。结果表明，3D培养的AdMSCs在dHAM支架内活力与分化潜能得以维持，细胞可穿透至17.68μm深度，证实该构建体在组织修复领域具有重要应用价值。

　　

组织工程(Tissue Engineering, TE)通过整合细胞、生物材料和生物活性分子，致力于构建功能性的组织替代物，以恢复组织功能并改善患者预后。人羊膜(human amniotic membrane, HAM)是一种被广泛研究的生物支架，适用于多种生物医学应用。对HAM进行脱细胞处理(decellularization, dHAM)是降低移植排斥反应的必要步骤，但这一过程会清除干细胞和生长因子，可能限制其再生潜力。本研究旨在利用一种新型的三维(3D)接种技术，将脂肪来源的间充质干细胞(adipose-derived mesenchymal stem cells, AdMSCs)重新种植到dHAM上，以增强其生物活性。研究人员采用创新的3D细胞接种方法，成功实现了AdMSCs在dHAM支架内的均匀分布。他们在二维(2D)和三维(3D)培养体系中评估了AdMSCs的活力、分化潜能和形态。通过流式细胞术(Flow Cytometry)评估了AdMSCs向成骨、成软骨和成脂谱系分化的能力。利用场发射扫描电子显微镜(Field Emission Scanning Electron Microscopy, FESEM)分析了细胞在支架内的形态和穿透深度。结果显示，AdMSCs在2D和3D培养环境下的细胞活力相当，这表明dHAM支架能有效支持细胞存活，不受培养技术的影响。dHAM的组成和特性在两种培养系统中均很好地保持了细胞功能。流式细胞术证实了AdMSCs具有多向分化潜能。FESEM成像显示，AdMSCs在支架表面伸出丝状伪足(filopodia)，并且细胞能够穿透dHAM基质深达17.68 μm。这项研究成功实现了AdMSCs在dHAM上的3D再细胞化，证明了dHAM作为干细胞递送生物支架的巨大潜力。该方法有望应用于组织修复和伤口愈合，从而提升基于dHAM的构建体的再生效能。