通过靶向高分辨率质谱技术评估一种无需蛋白酶的身体液体鉴定方法在性侵犯证据中的应用

《Journal of Proteome Research》：Assessment of a Protease-Free Method for Body Fluid Identification in Sexual Assault Evidence by Targeted High-Resolution Mass Spectrometry

唾液和精液生物标志物鉴定方法开发及验证。质谱蛋白质组学结合单步骤提取技术，通过靶向检测发现7种唾液标志物（PRB1等）和5种精液标志物（SEMG1等），并验证其在复杂样本中的可靠性。

　　

在性侵犯案件调查中，血清学筛查（包括免疫侧向流动检测）仍然是识别体液的一种常见方法，但其灵敏度和特异性不如现代DNA分析技术。为了解决这一不足，人们探索了基于质谱技术的蛋白质组学等替代分子方法。然而，这些方法的广泛应用受到繁琐的操作流程和对高精度仪器依赖的限制。本文介绍了一种无需使用蛋白酶的简化检测方法，用于识别性侵犯证据中的唾液和精液。样品通过一步操作提取后，利用Q Exactive质谱仪进行靶向数据分析（DDA），分离过程仅需25分钟，并通过Byos软件进行数据分析。所使用的96孔板格式便于实现高通量自动化分析。研究共分析了50份唾液样本和60份精液样本（其中包含5名已接受输精管切除术的男性的样本）。最终鉴定出7种唾液生物标志物（PRB1、PRB2、PRB4、PRH1、STATH、HTN1和SMR3B）以及5种精液生物标志物（SEMG1、SEMG2、PSA、PAP和PIP）。合成肽标准品用于验证鉴定结果并开发针对性的检测方法。该方法通过对168份法医样本（包括稀释样本、洗涤样本及受环境影响的样本）的检测得到了成功验证，这些样本来自不同的基质。