先天性膈疝动物模型中血管活性肠肽表达及其意义的探讨

《Pediatric Surgery International》：Investigation of vasoactive intestinal peptide expression and significance in a congenital diaphragmatic hernia animal model

本研究旨在探讨先天性膈肌缺陷（CDH）胎儿SD大鼠肺组织中血管活性肠肽（VIP）的表达及分布，并评估VIP类似物Aviptadil对CDH相关肺发育不良的影响。通过HE染色和免疫荧光分析发现，CDH组肺指数显著低于对照组，VIP mRNA和蛋白水平均下调，肺泡结构紊乱。Aviptadil组VIP水平部分恢复，肺泡结构改善，血管重塑减轻，为CDH肺发育不良治疗提供新思路。

　　

摘要

目的

研究先天性膈疝（CDH）胎儿Sprague-Dawley（SD）大鼠肺中血管活性肠肽（VIP）的表达和分布情况。评估VIP类似物Aviptadil对CDH相关肺发育不良的影响。

方法

在妊娠第9.5天（E9.5）通过灌胃硝基芬诱导SD大鼠发生CDH。CDH+VIP组从妊娠第10.5天（E10.5）开始通过尾静脉给予Aviptadil。通过苏木精-伊红（HE）染色评估肺发育情况。利用免疫荧光（IF）技术检测VIP、α-SMA和CD31的表达。通过RT-qPCR和Western blotting方法测定VIP的mRNA和蛋白质水平。

结果

与对照组相比，CDH组的肺指数显著降低（P<0.001），而CDH组和CDH+VIP组之间没有显著差异。与对照组相比，CDH组中VIP的mRNA（P=0.049）和蛋白质水平（P=0.049）均显著下调。HE染色显示对照组具有成熟的肺泡结构，而CDH组的肺结构受损。CDH+VIP组观察到部分改善。IF分析表明VIP主要位于支气管中。CDH组的VIP荧光强度显著低于对照组（P=0.002）和CDH+VIP组（P=0.005），而CDH+VIP组与对照组之间没有显著差异。α-SMA荧光主要位于肺动脉和支气管平滑肌中。与对照组相比，CDH组中α-SMA的表达显著上调（P<0.001）。CDH+VIP组的α-SMA表达显著低于CDH组（P=0.026），但与对照组无显著差异。CD31主要位于血管内皮细胞中。CDH组的CD31荧光强度显著高于对照组（P<0.001）和CDH+VIP组（P<0.001），且CDH+VIP组的CD31水平也显著高于对照组（P=0.005）。

结论

本研究表明，CDH大鼠肺中的VIP表达下调。在硝基芬诱导的SD大鼠模型中，Aviptadil部分恢复了VIP的水平，并有助于减轻血管重塑和肺泡发育不良，提示其可能在CDH相关的肺发育不良治疗中发挥潜在作用，值得进一步研究。