重组酶辅助扩增结合侧流层析技术快速检测烟草棒孢叶斑病

为解决烟草棒孢叶斑病（由Corynespora cassiicola引起）缺乏快速可靠检测方法的难题，研究人员开发了一种基于重组酶辅助扩增（RAA）与侧流层析试纸条（LFD）联用的检测技术（RAA-LFD）。该技术可在37℃恒温条件下20分钟内完成DNA扩增，特异性区分12种烟草病原体，灵敏度达10 pg（与常规PCR相当），结合碱性PEG裂解缓冲液粗提DNA，30分钟即可完成田间样本检测，为烟草病害防控提供了高效工具。

　　烟草棒孢叶斑病由真菌Corynespora cassiicola引发，严重危害烤烟品质，但现有技术难以区分相似病害。本研究创新性地将重组酶辅助扩增技术(RAA)与侧流层析试纸条(LFD)结合，开发出RAA-LFD检测体系——无需复杂仪器，37℃恒温环境下仅需20分钟即可完成靶标DNA扩增，且能从12种烟草病原体中精准锁定C. cassiicola。灵敏度测试显示，其对梯度稀释DNA（100 ng至1 pg）的检测下限达10 pg，媲美传统PCR。更令人振奋的是，配合碱性PEG裂解液快速粗提田间样本DNA，全程检测缩短至30分钟，犹如为植物病理学家配备了一把“分子快检枪”。该技术为烟草病害早期诊断和精准防控提供了突破性解决方案。