《European Journal of Medical Research》：Integrated bioinformatics analysis reveals that OPRK1 inhibits ferroptosis and induces enzalutamide resistance in prostate cancer
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为解决恩杂鲁胺（Enz）治疗去势抵抗性前列腺癌（CRPC）时患者产生耐药性的问题，研究人员开展了 OPRK1 在 Enz 耐药中作用的研究。结果发现 OPRK1 可抑制铁死亡诱导 Enz 耐药，这为耐药患者提供了新的治疗靶点。
前列腺癌是老年男性中常见的恶性肿瘤之一，严重威胁着他们的健康。目前，针对前列腺癌的治疗手段众多，但去势抵抗性前列腺癌（CRPC）的出现让治疗陷入困境。恩杂鲁胺（Enz）作为治疗 CRPC 的重要药物，却面临着耐药问题，这使得患者的治疗效果大打折扣，生存率难以得到有效提升。为了深入了解 Enz 耐药的机制，探寻新的治疗靶点，山西医科大学第一医院等机构的研究人员开展了相关研究，研究成果发表在《European Journal of Medical Research》上。
研究人员采用了多种关键技术方法。他们从基因表达综合数据库（GEO）获取数据，利用差异表达基因（DEG）分析筛选出与 Enz 耐药相关的基因；运用加权基因共表达网络分析（WGCNA）确定关键基因模块和枢纽基因；借助单细胞 RNA 测序（scRNA-seq）技术深入探究 OPRK1 下游的信号通路；通过细胞实验，如使用小干扰 RNA（siRNA）转染细胞，进行蛋白质免疫印迹（Western blotting）和集落形成实验，验证 OPRK1 在 Enz 耐药中的作用。
研究结果如下：
- 关键 Enz 耐药相关 DEGs 的鉴定和功能富集：通过对 GEO 数据库中多个数据集进行分析，比较 Enz 处理组和对照组的基因表达水平，确定了大量差异表达基因（DEGs）。对这些 DEGs 进行基因本体（GO）和京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路分析发现，它们主要富集在细胞增殖调控、激素反应、类固醇激素生物合成等相关通路，这表明 Enz 对前列腺癌存在潜在的调控作用。
- Enz 耐药基因共表达网络的揭示：运用 WGCNA 方法构建基因共表达网络，发现多个模块与 Enz 反应或 CRPC 存在显著相关性，如绿松石模块、棕色模块和蓝色模块。通过对 DEGs 和 WGCNA 模块中共享枢纽基因的分析，确定了多个与 Enz 耐药相关的候选基因。
- PCa 中的枢纽基因及其表达和预后：综合分析三个 GEO 数据集，发现 BTG2、OPRK1、PTGER2 和 TSPAN3 在所有数据集中均被识别出来。其中，OPRK1 在前列腺癌（PCa）样本中高表达，且与患者预后相关，这意味着 OPRK1 可能是 PCa 中 Enz 耐药的潜在生物标志物。
- OPRK1 下游信号通路的确定：通过 scRNA-seq 分析，研究人员发现 OPRK1 在 Enz 耐药组中表达升高。进一步对 OPRK1 阳性和阴性细胞进行分析，发现差异表达基因在细胞存活相关通路中显著富集，KEGG 富集分析显示涉及氧化磷酸化、糖酵解 / 糖异生和铁死亡等通路。基因集富集分析（GSEA）结果表明，OPRK1 抑制铁死亡通路。
- OPRK1 在 PCa Enz 反应中的体外作用：在体外 PCa 模型中，研究发现 Enz 刺激可上调 LNCaP 细胞中铁死亡通路相关蛋白的表达，而抑制 OPRK1 可激活铁死亡，减少 PCa 细胞增殖。这表明抑制 OPRK1 可能通过诱导铁死亡影响 PCa 细胞的活力，为克服 Enz 耐药提供了新策略。
研究结论和讨论部分指出，OPRK1 在 Enz 耐药的 PCa 中上调，与不良预后相关。敲低 OPRK1 可激活铁死亡通路，联合 Enz 治疗可抑制 PCa 进展。然而，该研究也存在一定局限性，如细胞水平研究无法完全代表整体生物体，缺乏 Enz 耐药患者的数据，OPRK1 抑制铁死亡和导致 Enz 耐药的精确分子机制尚不清楚等。尽管如此，这项研究依然具有重要意义，它首次明确了 OPRK1 在 PCa 中抑制铁死亡并诱导 Enz 耐药的作用，为后续开发针对 OPRK1 的靶向治疗药物、克服 Enz 耐药提供了理论依据和潜在方向，有望为前列腺癌患者带来新的治疗希望，推动前列腺癌治疗领域的进一步发展。
