B4M3 CAR-T细胞双靶向治疗卵巢癌：增强抗肿瘤活性与降低非肿瘤毒性的新策略

为解决CAR-T细胞在实体瘤治疗中面临的抗原异质性、脱靶毒性及疗效不足等挑战，东南大学团队开发了同时靶向B7H3和MSLN的双靶点B4M3 CAR-T细胞。研究通过体内外实验证实，B4M3 CAR-T能显著抑制卵巢癌生长，激活NF-κB和TNF信号通路诱导肿瘤细胞死亡，并改善代谢微环境。该研究为卵巢癌免疫治疗提供了兼具高效性与安全性的新方案。

　　

卵巢癌是妇科恶性肿瘤中致死率最高的癌种之一，约50%患者确诊时已进展至晚期，传统疗法效果有限。尽管CAR-T（嵌合抗原受体T细胞）疗法在血液肿瘤中取得突破，但其在实体瘤中的应用仍受限于抗原逃逸、肿瘤微环境抑制及脱靶毒性等瓶颈。尤其对于卵巢癌，单靶点CAR-T易因抗原丢失导致复发，而过度激活的免疫反应可能引发细胞因子释放综合征(CRS)。如何设计兼具精准性和持久性的CAR-T方案，成为领域内亟待解决的科学问题。

东南大学的研究团队创新性地构建了双靶向B7H3（一种免疫检查点分子）和MSLN（间皮素）的B4M3 CAR-T细胞，通过4-1BB共刺激域与CD3ζ信号域的协同优化，旨在同时克服抗原异质性和毒性难题。研究发现，B4M3 CAR-T在卵巢癌小鼠模型中展现出三大优势：快速清除肿瘤细胞、保护正常器官功能、以及重塑免疫代谢微环境。该成果发表于《International Immunopharmacology》，为实体瘤CAR-T治疗提供了重要范式。

研究采用多组学联用策略：通过实时细胞分析(RTCA)动态监测CAR-T杀伤效率；利用蛋白质组学解析肿瘤组织与关键器官的分子特征；结合生物信息学分析筛选NF-κB等关键通路；基于ARRIVE指南的动物实验验证安全性。

B4M3 CAR-T细胞展现卓越增殖与肿瘤杀伤效能
相较于单靶点CAR-T，B4M3 CAR-T对表达B7H3或MSLN的卵巢癌细胞系杀伤率提升2.1倍，且持续增殖能力显著增强。机制研究表明，双靶向设计通过降低抗原逃逸概率，维持了T细胞活化信号的连续性。

双靶向策略激活死亡受体通路
蛋白质组学分析显示，B4M3 CAR-T处理后肿瘤组织内TNF-α水平上升8.7倍，伴随caspase-3剪切体积累。这表明其通过死亡受体途径（如Fas/FasL系统）协同诱导肿瘤细胞凋亡。

代谢重编程增强T细胞持久性
质谱数据揭示，B4M3 CAR-T治疗的肿瘤组织中糖酵解中间产物减少，而线粒体氧化磷酸化相关蛋白上调。这种代谢重塑为CAR-T在低氧微环境中的存活提供了能量支持。

器官毒性显著降低
心、肝、肾组织的病理学评估显示，B4M3 CAR-T组炎症浸润评分较单靶点组降低63%，证实双靶向设计可提高靶向特异性。

该研究首次证实，B4M3 CAR-T通过三重机制发挥疗效：物理性清除肿瘤细胞、激活内源性死亡信号、以及代谢适应性进化。讨论部分指出，4-1BB共刺激域的选择可能是减少CRS风险的关键，而双靶点设计为应对实体瘤异质性提供了普适性思路。作者团队强调，未来需在非人灵长类模型中进一步验证安全性，并探索与其他免疫检查点抑制剂的联用策略。

从临床转化视角看，这项研究有两大突破：一是建立了卵巢癌特异性双靶点CAR-T的技术标准，二是为其他表达B7H3/MSLN的实体瘤（如胰腺癌、间皮瘤）提供了可借鉴的治疗框架。正如通讯作者Feng Ji在文中所言："B4M3 CAR-T代表了一种精准医学与合成免疫学的成功融合"。