靶向HPV16 E7蛋白的mRNA-LNP治疗性疫苗在HPV相关肿瘤小鼠模型中展现显著抗肿瘤效果

本研究针对高危型HPV持续感染导致的宫颈癌治疗难题，开发了基于突变E7蛋白的mRNA-LNP（脂质纳米颗粒）治疗性疫苗。通过微流控技术封装mRNA，该疫苗通过瘤内注射显著激活E7特异性CD8+ T细胞和Th1细胞，重塑免疫抑制性肿瘤微环境，为HPV相关肿瘤提供了安全高效的治疗策略。

　　

宫颈癌是全球女性癌症死亡的主要原因之一，而高危型人乳头瘤病毒（HPV）感染，尤其是HPV16型，是其主要诱因。尽管预防性HPV疫苗已取得显著成效，但对已感染或发展为癌前病变的患者束手无策。更棘手的是，HPV的致癌蛋白E7通过结合视网膜母细胞瘤蛋白（pRb）促进细胞恶性转化，而现有治疗手段如手术和放化疗后仍面临高复发风险。这一临床困境催生了针对E7蛋白的治疗性疫苗研发需求。

中国农业科学院兰州兽医研究所等机构的研究团队在《International Journal of Pharmaceutics》发表论文，创新性地将突变E7蛋白编码mRNA封装于脂质纳米颗粒（LNP），开发出新型治疗性疫苗。研究采用微流控技术制备mRNA-LNP复合物，通过比较瘤内（i.t.）与肌肉（i.m.）注射途径，系统评估了疫苗在TC-1肿瘤模型中的免疫激活与抗肿瘤效果。

关键技术包括：1）基于5′ UTR（非翻译区）优化构建高效表达载体；2）微流控技术制备mRNA-LNP疫苗；3）流式细胞术检测CD8⁺ T细胞和Th1细胞活化；4）肿瘤微环境免疫标志物分析。实验选用6-8周龄雌性C57BL/6小鼠建立HPV相关肿瘤模型。

5′ UTR优化增强蛋白表达
通过对比RSV、新冠疫苗及人α-珠蛋白来源的5′ UTR序列，筛选出可使增强型绿色荧光蛋白（EGFP）表达量提升2.1倍的优化结构，为后续疫苗设计奠定基础。

双途径给药诱导特异性免疫
瘤内注射组脾脏中E7特异性CD8⁺ T细胞比例较肌肉注射组显著提高（p<0.01），同时伴随更强的Th1型细胞因子分泌，证实局部给药可更有效激活细胞免疫。

重塑肿瘤免疫微环境
疫苗治疗显著降低肿瘤组织PD-1/CTLA-4等免疫检查点表达，减少髓源性抑制细胞（MDSC）浸润，使"冷肿瘤"转化为"热肿瘤"。

显著抑制肿瘤生长
治疗组小鼠肿瘤体积较对照组减少68%，生存期延长2.3倍（p<0.001），且未观察到明显毒性反应。

该研究首次证实HPV16 E7 mRNA-LNP疫苗通过优化递送途径可突破肿瘤免疫抑制屏障。相比传统疫苗，mRNA平台具有开发周期短、安全性高、可诱导强效细胞免疫等优势。特别值得注意的是，瘤内注射产生的"原位疫苗接种"效应，为临床联合免疫检查点抑制剂提供了新思路。研究团队提出的5′ UTR优化策略，也为其他肿瘤mRNA疫苗设计提供了普适性技术参考。这些发现不仅为HPV相关恶性肿瘤治疗带来突破性进展，更推动了核酸疫苗在肿瘤免疫治疗领域的应用边界。