《Pharmacological Research - Modern Chinese Medicine》：Regulatory effect of Pien Tze Huang on the mTreg/mTh17 balance in mice with autoimmune hepatitis
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本研究针对自身免疫性肝炎（AIH）治疗中糖皮质激素副作用大的临床难题，首次揭示传统中药片仔癀（PTH）可通过调控记忆性调节T细胞（mTreg）/记忆性辅助T细胞17（mTh17）平衡及糖酵解代谢通路，有效缓解刀豆蛋白A（ConA）诱导的小鼠AIH。研究发现PTH能显著改善肝组织病理损伤，降低ALT/AST水平，并通过下调HK2、PK等糖酵解关键酶及Glut1、STAT3等信号蛋白表达，重塑免疫稳态。该研究为中药免疫调节机制提供了新证据，发表于《Pharmacological Research - Modern Chinese Medicine》。
自身免疫性肝炎（Autoimmune Hepatitis, AIH）是一种以肝脏慢性炎症和免疫系统失衡为特征的严重疾病。随着生活方式改变和诊断水平提升，我国AIH发病率呈现逐年上升趋势。目前临床主要采用糖皮质激素进行治疗，但长期大剂量使用会引发代谢紊乱、神经精神异常等显著副作用，这促使科研人员不断探索更安全有效的替代疗法。
在AIH的复杂发病机制中，免疫细胞平衡失调尤为关键。特别是调节性T细胞（Treg）和辅助性T细胞17（Th17）之间的平衡关系，已成为当前免疫学研究的热点。更深入的研究发现，记忆性Treg（mTreg）和记忆性Th17（mTh17）细胞作为具有"免疫记忆"特性的细胞亚群，在自身免疫疾病的慢性化过程中扮演着重要角色。这些细胞的命运决定与能量代谢重编程密切相关，其中糖酵解代谢通路被证实是调控它们分化和功能的关键开关。
片仔癀（Pien Tze Huang, PTH）作为传统中药复方，由牛黄、蛇胆、三七、麝香等组成，既往研究已证实其在肝病治疗中具有抗炎、抗氧化和免疫调节作用。然而，PTH是否能够通过调节mTreg/mTh17细胞平衡来治疗AIH，其背后的分子机制如何，仍有待阐明。发表于《Pharmacological Research -Modern Chinese Medicine》的这项研究，正是针对这一科学问题开展的深入探索。
研究人员主要运用了以下关键技术方法：通过刀豆蛋白A（ConA）尾静脉注射建立小鼠AIH模型；采用超高效液相色谱-串联质谱法（UHPLC-MS/MS）分析PTH化学成分；通过HE染色评估肝组织病理变化；使用自动生化分析仪检测血清ALT和AST水平；采用ELISA法测定炎症因子和糖酵解酶含量；运用流式细胞术分析T细胞亚群；通过Western blot检测糖酵解相关蛋白表达。
3.1. PTH改善ConA诱导的AIH小鼠症状
研究显示，PTH治疗显著降低了AIH小鼠的肝脏和脾脏重量及指数，改善了肝组织病理损伤，降低了血清免疫球蛋白（IgG、IgA、IgM）和肝功指标（ALT、AST）水平，证实PTH对AIH具有明确治疗作用。
3.2. PTH缓解AIH小鼠炎症反应
PTH治疗显著降低了肝组织中促炎因子（TNF-α、IL-21、IL-6、IL-1β、IFN-γ）水平，同时提高了抗炎因子（IL-10、IL-4）表达，表明PTH可通过调节炎症因子网络发挥抗炎作用。
3.3. PTH对记忆Treg/Th17细胞数量的影响
流式细胞术分析发现，PTH增加了CD4+CCR7+、CD4+IL-10+、CD4+Foxp3+等Treg细胞亚群比例，降低了CD4+IL-17A+等Th17细胞比例。特别值得注意的是，PTH显著提升了各类记忆性Treg（mTreg）细胞数量，同时抑制了记忆性Th17（mTh17）细胞增殖，表明PTH可通过调节记忆性T细胞平衡发挥免疫调节作用。
3.4. PTH抑制AIH小鼠糖酵解活化
研究显示，PTH治疗降低了关键糖酵解酶（HK2、PK、LDHA、ALDOA、GCK、PEPCK）的血清水平。Western blot结果进一步证实，PTH可下调葡萄糖转运蛋白（Glut1、Glut2、Glut3、Glut4）、STAT3/p-STAT3、HIF-1α、T-bet和RORγt等糖酵解相关蛋白的表达，表明PTH可通过抑制过度糖酵解调节免疫细胞分化。
研究结论与讨论部分指出，PTH通过多靶点、多通路发挥治疗AIH的作用。在细胞水平，PTH可重塑mTreg/mTh17细胞平衡，增加具有免疫抑制功能的mTreg细胞，减少促炎性的mTh17细胞。在分子机制上，PTH通过抑制糖酵解通路关键酶和信号蛋白（如HIF-1α、STAT3/RORγt轴）的表达，调控T细胞分化命运。糖酵解代谢与免疫细胞功能的密切关联为理解中药免疫调节机制提供了新视角：过度糖酵解可促进mTh17分化并抑制mTreg功能，而PTH恰好可逆转这一异常代谢状态。
该研究的创新性在于首次系统阐明了PTH通过"糖酵解-mTreg/mTh17轴"治疗AIH的免疫代谢机制，不仅为中药现代化研究提供了新思路，也为AIH的临床治疗提供了潜在新策略。然而，研究也存在一定局限性，如未使用性别平衡的实验设计、缺乏糖酵解缺陷小鼠模型的验证、缺少体外细胞实验佐证等，这些都有待后续研究进一步完善。总体而言，这项工作深化了对PTH免疫调节作用机制的认识，为传统中药在自身免疫疾病治疗中的应用提供了重要科学依据。
