《Nature Communications》：TIGIT disruption rescues the antitumor activity of low avidity TCR-engineered T cells by increasing TCR signal strength
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本研究针对低亲和性T细胞在过继性T细胞疗法（ACT）中疗效不足的难题，通过碱基编辑技术敲除T细胞抑制性受体TIGIT，显著增强了低亲和性TCR工程化T细胞对抗胰腺导管腺癌（PDAC）的能力。研究发现TIGIT缺失通过强化TCR信号转导促进免疫突触稳定，使低亲和性T细胞产生与高亲和性细胞相当的脱颗粒活性和持久抗肿瘤效果，为拓展TCR-T细胞疗法在实体瘤治疗中的应用提供了新策略。
在肿瘤免疫治疗领域，过继性T细胞疗法（Adoptive T Cell Therapy, ACT）已成为突破性的治疗手段。然而该疗法面临一个关键瓶颈：从癌症患者体内分离的高亲和性肿瘤特异性T细胞数量稀少，而低亲和性T细胞又难以有效杀伤肿瘤细胞。这一困境在胰腺导管腺癌（Pancreatic Ductal Adenocarcinoma, PDAC）等实体瘤中尤为突出。面对肿瘤微环境的抑制机制，T细胞功能易出现耗竭（exhaustion）状态，其中T细胞免疫球蛋白和ITIM结构域（TIGIT）作为关键抑制性受体，在浸润胃肠肿瘤的耗竭CD8+T细胞上高表达，进一步削弱T细胞活性。
为破解这一难题，研究人员将目光投向TIGIT这一免疫检查点。通过前沿的碱基编辑（base editing）技术对低亲和性T细胞受体（T Cell Receptor, TCR）工程化T细胞进行TIGIT基因敲除，研究团队发现这一操作能有效挽救低亲和性T细胞抗肿瘤功能。机制研究表明，TIGIT缺失增强了弱TCR信号引发的细胞内信号转导，促进细胞骨架重排，进而提升T细胞亲和性并稳定免疫突触（immunological synapse）形成。这一系列分子水平的变化最终转化为强大的抗肿瘤效果：经TIGIT敲除处理的低亲和性T细胞展现出与高亲和性T细胞相当的脱颗粒（degranulation）能力，并在雄性小鼠模型中表现出持久且强效的抗肿瘤活性。
该研究发表于《Nature Communications》，主要采用碱基编辑技术构建TIGIT敲除的T细胞模型，通过体外TCR信号强度检测、免疫突触形态观察、细胞脱颗粒实验等分子免疫学方法，并结合PDAC雄性小鼠模型进行体内抗肿瘤功能验证。
研究结果
TIGIT缺失增强低亲和性TCR工程化T细胞的细胞毒性
通过比较TIGIT敲除与野生型低亲和性T细胞对PDAC细胞的杀伤效果，研究发现TIGIT缺失组T细胞溶解肿瘤细胞的能力显著提升，其细胞毒性强度与高亲和性T细胞相当。这表明靶向TIGIT可有效弥补低亲和性T细胞的功能缺陷。
TIGIT调控TCR信号通路的分子机制
利用磷酸化流式细胞术检测TCR下游信号分子发现，TIGIT敲除增强了弱TCR engagement引发的PLCγ1和ERK磷酸化水平。进一步研究表明，这种信号增强促进了F-肌动蛋白聚合和细胞骨架重组，为免疫突触稳定提供了结构基础。
免疫突触稳定性与T细胞功能关联分析
通过高分辨率显微镜观察T细胞-肿瘤细胞接触界面，发现TIGIT敲除低亲和性T细胞形成的免疫突触更稳定，突触内信号分子聚集时间延长。这种结构改善直接关联到更高效的细胞因子分泌和脱颗粒反应。
体内抗肿瘤效果持久性验证
在PDAC荷瘤雄性小鼠模型中，输注TIGIT敲除低亲和性T细胞的小鼠肿瘤生长显著抑制，生存期延长。重要的是，这种抗肿瘤效果在观察期内保持稳定，且处理组小鼠未见明显自身免疫反应，证实该策略的治疗安全性。
研究结论与意义
本研究首次揭示TIGIT缺失通过增强TCR信号通路重塑低亲和性T细胞功能的分子机制。不仅阐明了TIGIT在调控免疫突触稳定性中的新功能，更为拓展ACT疗法在实体瘤治疗中的应用提供了创新策略。通过碱基编辑技术靶向TIGIT，可有效突破天然高亲和性T细胞稀缺的限制，大幅拓宽TCR工程化T细胞的临床应用潜力，对胰腺癌及其他TIGIT高表达实体瘤的治疗具有重要转化价值。
