靶向全长MUC1与截短MUC1β的双表位CAR-T细胞规避卵巢癌抗原脱落介导的免疫逃逸

《Journal of Translational Medicine》：Biparatopic CAR-T cells targeting full-length MUC1 and truncated MUC1β circumvent MUC1α shedding in ovarian cancer

　　

摘要

背景

MUC1 是由 α 和 β 亚基组成的跨膜蛋白，在许多癌症中过表达。大多数靶向 MUC1 的 CAR-T 策略主要针对易脱落的 MUC1α 亚基，这使得它们在 MUC1α 脱落后的表位丢失面前潜在脆弱。与此同时，MUC1α 脱落后暴露的膜保留型截短 MUC1β 上的新表位受到的关注相对有限。在此，我们报道了首个同时靶向全长 MUC1 和截短 MUC1β 的双表位 CAR。

方法

我们筛选了羊驼免疫抗体库以分离出靶向截短 MUC1β 的抗体。我们使用两种分别识别截短 MUC1β 和肿瘤相关 MUC1α 糖型的抗体在卵巢癌组织中进行多重免疫组化，以原位定义 MUC1 的形式。然后我们构建了靶向全长 MUC1 和截短 MUC1β 的 MUC1 双表位 CAR-T 细胞，并在体外卵巢癌细胞系、体内异种移植模型以及患者来源的类肿瘤细胞簇中检验了其功能。我们还评估了可溶性 MUC1α 对 MUC1 双表位 CAR-T 细胞的影响。

结果

我们发现 MUC1 通常以部分脱落状态存在，全长 MUC1 和截短 MUC1β 在卵巢癌组织中共同出现。在体外，MUC1 双表位 CAR-T 细胞显示出更广泛的目标覆盖范围，无论 MUC1 是以全长 MUC1 单独存在、截短 MUC1β 单独存在还是两者共存的形式出现，都能高效识别并杀伤 MUC1 阳性的卵巢癌细胞，而单特异性 CAR-T 细胞仅杀伤显示其对应表位的靶细胞。MUC1 双表位 CAR-T 细胞对共表达全长 MUC1 和截短 MUC1β 的靶标也显示出更高的细胞毒性和细胞因子释放。值得注意的是，可溶性 CA153 未损害 MUC1 双表位 CAR-T 细胞的杀伤能力，反而诱导了 CAR-T 活化。MUC1 双表位 CAR-T 细胞在卵巢肿瘤异种移植模型中表现出优越的肿瘤控制能力，并对卵巢癌患者来源的类肿瘤细胞簇显示出增强的活性。

结论

我们的研究确立了 MUC1α 部分脱落是卵巢癌的一种普遍且可利用的特征，并支持靶向全长 MUC1 和脱落暴露的截短 MUC1β 的双表位 CAR 作为一种有前途的策略，以规避 MUC1 阳性卵巢癌中的抗原脱落介导的逃逸。