非流行地区BioFire FilmArray?热带热病检测板检测疟疾的分析敏感性与种水平鉴定性能评估

《Malaria Journal》：Evaluation of the analytical performance of the BioFire FilmArray Tropical Fever Panel for detection of malaria in archived EDTA-blood samples

　　摘要背景在非流行地区，快速可靠的疟疾诊断至关重要，因为这些地区大多数检测样本为阴性，且难以维持显微镜检查的专业能力。环介导等温扩增技术（LAMP）具有较高敏感性，但本研究所使用的商用LAMP检测试剂盒无法进行物种鉴定。BioFire FilmArray?热带热病（TF）检测板是一种多重PCR检测，旨在50分钟内检测疟原虫物种及其他热带病原体。本研究评估了TF检测板在非流行地区的分析敏感性及其种水平鉴定的性能。方法为估算TF检测板的检测限（LoD），对已知恶性疟原虫原虫血症的临床样本进行十倍梯度稀释测试，并与Alethia疟疾LAMP检测试剂盒进行比较。为进一步评估TF检测板的性能，对30份此前LAMP或RDT检测阳性的存档临床样本进行了分析。在这些样本中，通过聚合酶链反应（PCR）扩增和Oxford Nanopore对疟原虫线粒体DNA中的cox III基因测序来确定物种鉴定。为进一步考验TF检测板鉴定疟原虫属的能力，还配制并测试了混合物种样本（N=3）。最后，纳入5份LAMP检测阴性的临床样本作为阴性对照。结果TF检测板展现了较高的分析敏感性，在0.05个寄生虫/μL浓度下，4/5个重复样本中检测到恶性疟原虫，而LAMP在同一浓度下仅1/5个重复样本检测到。所有恶性疟原虫感染均被正确检出。非恶性疟感染均报告为间日疟原虫/卵形疟原虫，其中包括含有诺氏疟原虫（N=1）和恶性疟原虫（N=1）的样本。对于配制的多物种样本，TF检测板正确鉴定了恶性疟原虫，但未能准确区分非恶性疟物种。在一个含有两种非恶性疟物种的样本中，该检测未能发现混合感染。所有阴性对照均被正确报告为疟原虫阴性。结论TF检测板对恶性疟原虫检测展现了较高的分析敏感性，但显微镜检查在评估原虫血症水平和治疗监测方面仍然必要。尽管对非恶性疟物种的鉴别能力有限，但该检测可能有助于缩短诊断时间，并减少常规临床实践中对紧急显微镜检查的依赖。