循环 miR-1260a 作为首发精神病（First-Episode Psychosis, FEP）潜在生物标志物：在未治疗罗马尼亚青少年和年轻成人队列中的复制研究

《Frontiers in Psychiatry》：Circulating miR-1260a as a potential biomarker for First-Episode of Psychosis: a replication study in a treatment-Na?ve Romanian cohort

　　

青少年和年轻成人中首发精神病（first-episode psychosis, FEP）的诊断仍主要基于临床，常因症状重叠和精神科表现的异质性而复杂化。迫切需要非侵入性、客观的生物标志物以支持早期诊断和患者分层。本研究旨在在一个更大、独立的未治疗罗马尼亚青少年和年轻成人队列中，复制先前探索性研究鉴定的10个候选microRNA（miRNA）panel。该横断面研究纳入50名参与者（22例未用药FEP患者和28名年龄、性别匹配的对照）。从血浆中分离总RNA，并用定量逆转录聚合酶链反应（qRT-PCR）测量miRNA水平。临床症状使用标准化精神科量表评估（阳性与阴性症状量表，PANSS；汉密尔顿抑郁评定量表，HDRS；Young躁狂评定量表，YMRS）。研究人员成功复制出 miR-1260a 在未治疗FEP患者血浆中相较于对照显著改变（FDR Adj. p = 0.04）。miR-1260a 的受试者工作特征（ROC）曲线分析得出曲线下面积（AUC）为0.741（p = 0.004）。此外，仅在FEP患者组内进行的探索性相关分析表明，miR-1260a 水平与阳性PANSS评分呈负相关（p = 0.017, rho = -0.503），但经FDR校正后未保留统计学显著性（FDR Adj. p = 0.102）。研究结果证实并增强了先前的探索性研究，突出 miR-1260a 作为早期精神病循环生物标志物中的重要候选者。未来需要纵向研究评估该miRNA的诊断、预后和临床监测效能。

论文解读：循环 miR-1260a 作为首发精神病潜在生物标志物：未治疗罗马尼亚队列复制研究

引言。精神分裂症谱系障碍是致残性精神疾病之一，可导致社会、职业和教育功能残疾，并降低生活质量、增加全球医疗负担。精神病性障碍以感知、思维、认知、情绪加工和行为紊乱为特征，正式诊断基于阳性症状（如妄想、幻觉）、阴性症状（如情感平淡、言语贫乏、意志缺乏）、言语或行为紊乱或紧张症。其发病主要集中在青少年和早期成年，与突触修剪、皮层成熟和神经连接重组等神经发育变化重合。流行病学数据显示，精神分裂症谱系障碍中位发病年龄约25岁，发病高峰约20岁，近半数病例在25岁前诊断；男性通常发病更早，临床过程较差，复发率更高、缓解率更低。当前诊断完全依赖临床评估和基于症状的分类系统，如DSM或ICD，这存在症状非特异、波动、与情感或发育障碍重叠等局限，尤其在疾病前驱和早期阶段。青年诊断更具挑战，因为临床表现异质且该年龄组持续发育变化。因此，识别可支持早期诊断和患者分层的客观、非侵入性生物标志物具有重要意义。目前精神病病理生理机制尚未完全明确，基因与环境交互是最广泛接受的理论，近期研究强调表观遗传学在精神分裂症和精神病性障碍中曾被忽视的作用。首发精神病（first-episode psychosis, FEP）期间研究的生物标志物可提供独特机会，在长期抗精神病治疗、反复发作或慢性疾病进展影响之前探索与疾病起病相关的分子机制。外周血来源生物标志物因微创、相对便宜且较中枢神经系统检查更易获得而受到关注。microRNA（miRNA）是约18–25个核苷酸的小非编码RNA，在转录后水平调节基因表达；通过与靶信使RNA（mRNA）互补序列结合，可抑制翻译或促进mRNA降解，从而影响多种生物过程。在中枢神经系统中，miRNA参与神经发育、突触可塑性、炎症信号、氧化应激和多巴胺能神经传递。循环miRNA可从血浆、血清、全血、外周血单核细胞和细胞外囊泡中分离，并对酶降解或pH变化保持高稳定性。系统综述发现，多数精神病性障碍miRNA研究未区分年龄组，而miRNA表达已被证明随发育阶段变化；慢性化也可能促进中枢神经系统神经生物学改变。治疗暴露也可显著影响miRNA表达，因此纳入未治疗受试者可能获得更清晰结果。东欧人群循环miRNA数据仍稀缺，尤其关于未治疗FEP患者。先前探索性研究分析14名罗马尼亚青少年血浆中179个miRNA，鉴定出由21个miRNA组成的与FEP相关的signature。鉴于精神病性障碍中循环miRNA生物标志物复制有限，本研究旨在独立扩大队列中复制10个候选miRNA，这些miRNA基于高倍数变化（fold change, FC）值和统计显著性从先前探索性signature中选出，队列包括22例未治疗FEP患者和28名未治疗健康对照（CTRL）。

材料与方法。样本队列来源为同一医院，2024年3月至2026年6月招募50名罗马尼亚青少年和年轻成人（22例FEP，28例CTRL），不包含先前探索性研究中的患者和对照。FEP纳入标准为：依据国际疾病分类第10版（ICD-10）诊断急性短暂精神病性障碍；无既往精神科诊断；过去3个月无精神药物史，或当前发作治疗不超过7天（未治疗）；年龄15–29岁。排除标准包括：采血前7天内或过去3个月内使用精神药物、既往任何精神疾病诊断、可能引起精神病性症状的器质性诊断、病前发育异常或智力障碍、物质使用、患者或监护人拒绝同意。研究经Prof. Dr. Alexandru Obregia” Clinical Hospital of Psychiatry伦理委员会批准（No. 137/22.02.2024），遵循《赫尔辛基宣言》。精神科评估使用阳性与阴性症状量表（PANSS）、 shortened Hamilton抑郁评定量表（HDRS）和Young躁狂评定量表（YMRS）。关键技术方法为：从血浆分离总RNA，使用qRT-PCR检测10个候选miRNA；基于先前研究中27个最佳表达miRNA的Ct值，用RefFinder选择内参，最终以let-7b-5p单独归一化；因miRNA水平非正态分布，采用非参数Mann–Whitney检验、FC、Spearman相关、FDR校正和ROC/AUC分析。

结果。研究人群与混杂因素方面，FEP患者组和CTRL组在性别、年龄、饮酒和吸烟状态方面可比，差异无统计学显著性。吸烟有轻微数值差异但未达统计学显著性，且吸烟者与非吸烟者之间所有miRNA水平无差异。睡眠时长组间差异显著，FEP患者报告睡眠小时数少于对照；但睡眠时长与候选miRNA表达在FEP组、CTRL组或整个队列中均无统计学显著相关，因此判定睡眠时长不是这些生物标志物的混杂变量；此外，睡眠障碍和睡眠时长改变被广泛认为是FEP精神病理的核心内在特征而非独立背景特征。miR-1260a的复制与诊断效能方面，在先前小队列探索性研究中显示FEP未治疗患者水平不同的10个miRNA中，miR-1260a在本研究50名青少年和年轻成人独立队列中成功复制。复制标准为在当前独立队列中达到统计学显著性，并相对初始探索性研究表现出一致方向和可比效应量。miR-1260a在FEP组较CTRL显著下调（raw p = 0.004，FDR Adj. p = 0.04，FC = 0.53），研究人员以2^-ΔCt值展示个体miR-1260a水平；ROC分析显示中等区分能力（AUC = 0.741，p = 0.004）。miR-1260a与临床症状的相关性方面，仅在FEP患者组内进行的相关分析表明，miR-1260a水平与阳性PANSS评分呈负相关（p = 0.017，rho = -0.503），但经FDR校正后未保留统计学显著性（FDR Adj. p = 0.102）。

讨论。本研究在更大队列的未治疗罗马尼亚青少年和年轻成人FEP患者中，成功复制了10个候选循环miRNA中的miR-1260a。结果证明，与年龄和性别匹配的健康对照相比，miR-1260a显著下调，并具有中等区分能力，提示该分子改变在疾病起病时即存在。独立复制是精神病生物标志物开发的关键步骤，因为外周表观遗传标记包括miRNA的跨研究可重复性历来有限。本研究中miR-1260a下调与探索性研究报告的方向一致。除精神病性障碍外，miR-1260a表达改变此前曾在与炎症性肠病相关的抑郁和焦虑患者中以及阿尔茨海默病中报道，但在精神疾病中仍未表征。其他诊断组的发现不应被解释为相同下游靶点或机制在FEP中运作的证据，因为miRNA效应常高度依赖情境（细胞类型、发育阶段、组织来源、共病和实验条件），且方向性可在不同队列和疾病间不同。因此，在缺乏精神病相关组织或模型中的机制实验时，本研究结果主要支持miR-1260a作为与FEP复制的外周关联，而非明确的因果通路。本研究的探索性发现是FEP组内循环miR-1260a水平与PANSS阳性症状严重程度评分负相关，尽管该关联经FDR校正后未保留统计学显著性。该模式与以下可能性相容：某些外周miRNA改变可能不仅与病例–对照状态相关，也与症状维度相关；但鉴于样本量有限和多重检验负担，该观察应谨慎解释，直至被复制。重要的是，当前横断面设计不能进行因果推断，外周循环miRNA应解释为外周分子相关物，而非中枢神经系统分子活动的直接代理。miRNA可在多种精神表型中失调，可能反映传统诊断类别间的生物学重叠。遗传和调控研究表明，miRNA相关调控网络与精神科风险架构相关，并可能跨诊断类别共享，这可能降低任何单一miRNA作为疾病特异性生物标志物的特异性。从这一角度看，循环miRNA最终可能在整合入多模态模型时最有用，例如分子panel结合临床和其他生物学测量，而不是被解释为FEP的独立机制指标。尽管精神分裂症及相关障碍中已有循环miRNA谱改变的报道，但专门聚焦未治疗首发样本的研究相对较少，研究青少年和年轻成人的更少。该领域可重复性有限可能反映采样、分析流程、种族、疾病阶段、物质暴露，尤其药物状态的异质性。通过使用与先前研究相同的方法在独立队列中复制miR-1260a，本研究解决了文献的一个关键限制，即独立验证稀缺。本研究主要优势之一是纳入未治疗罗马尼亚FEP患者。抗精神病药物已被证明影响外周miRNA表达，使得在包含长期治疗患者的研究中难以区分疾病相关分子改变与治疗相关效应。通过研究长期药物暴露前和疾病早期个体，本研究结果更可能识别与精神病本身相关的生物标志物，而非药物或慢性疾病进展导致的继发改变。此外，限制样本为青少年和年轻成人可最小化衰老混杂效应，因为循环miRNA表达已知随发育阶段变化。总体而言，未治疗状态、独立复制和相对同质的发育年龄范围相结合，减少了限制既往循环miRNA研究的若干主要生物异质性来源。据研究人员所知，这是首个独立验证研究，调查未治疗罗马尼亚青少年和年轻成人FEP中循环miRNA表达。这扩展了超出最常研究人群的可用证据，并促进候选生物标志物更地理多样化的评估。因为miRNA谱可受遗传背景和环境暴露塑造，跨人群验证对建立普遍性和可重复性很重要。本研究也有若干局限。第一，尽管样本量大于先前试点研究，但仍相对中等，限制了检测较小效应和临床相关性的效能。第二，横断面设计不能评估治疗后或疾病进展期间miRNA表达的时间变化。第三，循环血浆miRNA来源于多个外周组织，不能假定反映脑特异性机制。此外，BMI可能是潜在混杂因素，但并非所有参与者均可获得。最后，尽管候选miRNA基于先前探索性发现选择，功能验证和机制研究超出本工作范围，在得出FEP生物通路结论前仍必要。

结论翻译。总之，未治疗罗马尼亚青少年和年轻成人FEP表现出独特的循环血浆miRNA谱，其特征为miR-1260a的复制性下调，该miRNA显示中等区分能力以及与阳性症状严重程度的初步关联。这些发现支持miR-1260a作为疾病起病附近存在的候选外周生物标志物信号；然而，基于其他疾病miRNA研究的机制解释应被视为情境性和假设生成性，而非FEP共享机制的证据，尤其考虑到与其他共享相似症状维度的精神表型存在显著临床和分子重叠。需要更大规模纵向研究整合转录组、临床和神经影像数据，以确定其诊断和预后效用。