乳酰化作用增强了DCBLD1介导的PDIA3稳定性，从而重新编程了食管癌中的糖酵解代谢过程

《Journal of Cancer Research and Clinical Oncology》：Lactylation-augmented DCBLD1-mediated PDIA3 stabilization reprograms glycolysis metabolism in oesophageal cancer

　　

摘要

目的

组蛋白乳酸化（Hla）是一种新的表观遗传标记，可促使细胞向恶性状态转变。迄今为止，Discoidin、CUB和含有LCCL结构域的I型蛋白（DCBLD1）已被证实为致癌基因。本项目重点研究了DCBLD1通过乳酸修饰途径在食管癌中的功能作用。

方法

本研究评估了DCBLD1（蛋白二硫键异构酶A家族成员3，PDIA3）在食管癌中的表达情况及其相互关系。采用RT-qPCR和Western blotting技术检测DCBLD1和PDIA3的表达水平；Western blotting还用于量化DCBLD1的赖氨酸乳酸化（kla）程度。通过氯己定（CHX）实验测定DCBLD1的半衰期。利用EDU、伤口愈合实验、Transwell迁移实验、流式细胞术和Seahorse代谢检测技术分别评估细胞增殖、迁移、凋亡和糖酵解过程。Co-IP实验用于检测DCBLD1与PDIA3之间的相互作用。在组织学评估（H&E染色）之前，还观察了异种移植肿瘤的形成情况。同时检测了葡萄糖消耗量和乳酸生成量以评估糖酵解过程。

结果

在食管癌样本和细胞中，DCBLD1的表达水平显著升高。当肿瘤细胞暴露于乳酸（LA）或需氧糖酵解抑制剂2-脱氧-D-葡萄糖（2-DG）时，DCBLD1的半衰期分别缩短或延长。食管癌组织中DCBLD1-Kla的水平上调。乳酸脱氢酶A（LDHA）的干扰作用降低了DCBLD1及其Kla形式的表达。PDIA3在食管癌中的表达水平也较高。DCBLD1在乳酸刺激下与PDIA3呈正相关并与其发生相互作用。DCBLD1的敲低抑制了细胞增殖、迁移和糖酵解，并诱导细胞凋亡，同时抑制了肿瘤进展和体内糖酵解，这些效应部分可通过PDIA3的过表达得到恢复。进一步下调LDHA会加剧DCBLD1敲低和PDIA3过表达在体外和体内的联合效应。

结论

研究结果表明，DCBLD1的乳酸化修饰与PDIA3结合，共同促进了食管癌的恶性进展和糖酵解过程。

目的

组蛋白乳酸化（Hla）是一种新的表观遗传标记，可促使细胞向恶性状态转变。迄今为止，Discoidin、CUB和含有LCCL结构域的I型蛋白（DCBLD1）已被证实为致癌基因。本项目重点研究了DCBLD1通过乳酸修饰途径在食管癌中的功能作用。

方法

本研究评估了DCBLD1（蛋白二硫键异构酶A家族成员3，PDIA3）在食管癌中的表达情况及其相互关系。采用RT-qPCR和Western blotting技术检测DCBLD1和PDIA3的表达水平；Western blotting还用于量化DCBLD1的赖氨酸乳酸化（kla）程度。通过氯己定（CHX）实验测定DCBLD1的半衰期。利用EDU、伤口愈合实验、Transwell迁移实验、流式细胞术和Seahorse代谢检测技术分别评估细胞增殖、迁移、凋亡和糖酵解过程。Co-IP实验用于检测DCBLD1与PDIA3之间的相互作用。在组织学评估（H&E染色）之前，观察了异种移植肿瘤的形成情况。同时检测了葡萄糖消耗量和乳酸生成量以评估糖酵解过程。

结果

在食管癌样本和细胞中，DCBLD1的表达水平显著升高。当肿瘤细胞暴露于乳酸（LA）或需氧糖酵解抑制剂2-脱氧-D-葡萄糖（2-DG）时，DCBLD1的半衰期分别缩短或延长。食管癌组织中DCBLD1-Kla的水平上调。乳酸脱氢酶A（LDHA）的干扰作用降低了DCBLD1及其Kla形式的表达。PDIA3在食管癌中的表达水平也较高。DCBLD1在乳酸刺激下与PDIA3呈正相关并与其发生相互作用。DCBLD1的敲低抑制了细胞增殖、迁移和糖酵解，并诱导细胞凋亡，同时抑制了肿瘤进展和体内糖酵解，这些效应部分可通过PDIA3的过表达得到恢复。进一步下调LDHA会加剧DCBLD1敲低和PDIA3过表达在体外和体内的联合效应。

结论

研究结果表明，DCBLD1的乳酸化修饰与PDIA3结合，共同促进了食管癌的恶性进展和糖酵解过程。