在椎间盘退变过程中，LINC00324通过靶向miR-143-3p的TRAIL/DR4/DR5轴诱导髓核细胞凋亡

《Biology Direct》：LINC00324 induces nucleus pulposus cell apoptosis in intervertebral disc degeneration via miR-143-3p targeted TRAIL/DR4/DR5 axis

【字体：大中小】 时间：2026年07月05日 来源：Biology Direct 5.5

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　　摘要背景椎间盘退变是导致脊柱退行性疾病和腰痛的主要病理因素。长非编码RNA在椎间盘退变的发病机制中起着重要作用。然而，某种特定的长非编码RNA——LINC00324，在椎间盘退变发展中的作用机制尚不明确。本研究旨在阐明LINC00324在椎间盘退变中的功能作用及其潜在的分子机制。

摘要

背景

椎间盘退变是导致脊柱退行性疾病和腰痛的主要病理因素。长非编码RNA在椎间盘退变的发病机制中起着重要作用。然而，某种特定的长非编码RNA——LINC00324，在椎间盘退变发展中的作用机制尚不明确。本研究旨在阐明LINC00324在椎间盘退变中的功能作用及其潜在的分子机制。

方法

通过RT-qPCR检测椎间盘退变患者与正常对照组的椎间盘组织中LINC00324、miR-143-3p和TRAIL的表达水平，并进行相关性分析。此外，还利用生物信息学工具、双荧光素酶报告基因实验以及RNA拉取实验，研究核 pulposus细胞中LINC00324/miR-143-3p/TRAIL之间的调控关系。在体外实验中，通过脂多糖刺激构建椎间盘退变细胞模型，再利用RT-qPCR、Western blot、CCK-8试验和流式细胞术，检测LINC00324/miR-143-3p/TRAIL/DR4/DR5的水平变化，以及NPC的增殖和凋亡情况。同时，通过Western blot和ELISA分别检测细胞外基质相关蛋白和炎症因子。在体内实验中，通过纤维环穿刺建立大鼠椎间盘退变模型，通过X射线检查、HE染色、TUNEL染色和Western blot，评估椎间盘结构变化、NPC凋亡情况，以及miR-143-3p/TRAIL/DR4/DR5和凋亡相关蛋白的水平。

结果

临床数据显示，椎间盘退变样本中LINC00324和TRAIL水平升高，而miR-143-3p水平下降。miR-143-3p与TRAIL和LINC00324呈负相关。此外，LINC00324可吸附miR-143-3p，而miR-143-3p能降低TRAIL的水平。在体外椎间盘退变模型中，LPS处理会导致NPC存活率下降、凋亡增加、细胞外基质代谢紊乱（II型胶原和聚糖表达下降，MMP13表达上升）、炎症因子升高，同时TRAIL/DR4/DR5通路被激活。沉默LINC00324或过表达miR-143-3p可缓解这些病理变化。此外，在椎间盘退变模型中，miR-143-3p可部分抵消LINC00324过表达对NPC凋亡、细胞外基质降解、炎症反应及TRAIL/DR4/DR5通路激活的促进作用。在体内实验中，LINC00324过表达会加重大鼠的椎间盘退变（椎间盘高度指数下降、NPC组织结构破坏、NPC凋亡加剧、细胞外基质降解加重、miR-143-3p表达受抑，TRAIL/DR4/DR5通路被激活），而敲低LINC00324则可减轻这些退行性变化。

结论

综上所述，LINC00324通过吸附miR-143-3p来激活TRAIL/DR4/DR5通路，进而诱导NPC凋亡、扰乱细胞外基质代谢并增强炎症反应，从而推动椎间盘退变的进展。

临床试验编号

无。

图形摘要

背景

椎间盘退变是导致脊柱退行性疾病和腰痛的主要病理因素。长非编码RNA在椎间盘退变的发病机制中起着重要作用。然而，某种特定的长非编码RNA——LINC00324，在椎间盘退变发展中的作用机制尚不明确。本研究旨在阐明LINC00324在椎间盘退变中的功能作用及其潜在的分子机制。

方法

通过RT-qPCR检测椎间盘退变患者与正常对照组的椎间盘组织中LINC00324、miR-143-3p和TRAIL的表达水平，并进行相关性分析。此外，还利用生物信息学工具、双荧光素酶报告基因实验以及RNA拉取实验，研究核 pulposus细胞中LINC00324/miR-143-3p/TRAIL之间的调控关系。在体外实验中，通过脂多糖刺激构建椎间盘退变细胞模型，再利用RT-qPCR、Western blot、CCK-8试验和流式细胞术，检测LINC00324/miR-143-3p/TRAIL/DR4/DR5的水平变化，以及NPC的增殖和凋亡情况。同时，通过Western blot和ELISA分别检测细胞外基质相关蛋白和炎症因子。在体内实验中，通过纤维环穿刺建立大鼠椎间盘退变模型，通过X射线检查、HE染色、TUNEL染色和Western blot，评估椎间盘结构变化、NPC凋亡情况，以及miR-143-3p/TRAIL/DR4/DR5和凋亡相关蛋白的水平。

结果

临床数据显示，椎间盘退变样本中LINC00324和TRAIL水平升高，而miR-143-3p水平下降。miR-143-3p与TRAIL和LINC00324呈负相关。此外，LINC00324可吸附miR-143-3p，而miR-143-3p能降低TRAIL的水平。在体外椎间盘退变模型中，LPS处理会导致NPC存活率下降、凋亡增加、细胞外基质代谢紊乱（II型胶原和聚糖表达下降，MMP13表达上升）、炎症因子升高，同时TRAIL/DR4/DR5通路被激活。沉默LINC00324或过表达miR-143-3p可缓解这些病理变化。此外，在椎间盘退变模型中，miR-143-3p可部分抵消LINC00324过表达对NPC凋亡、细胞外基质降解、炎症反应及TRAIL/DR4/DR5通路激活的促进作用。在体内实验中，LINC00324过表达会加重大鼠的椎间盘退变（椎间盘高度指数下降、NPC组织结构破坏、NPC凋亡加剧、细胞外基质降解加重、miR-143-3p表达受抑，TRAIL/DR4/DR5通路被激活），而敲低LINC00324则可减轻这些退行性变化。