患有牙周炎的MAFLD患者龈下菌斑与唾液微生物群的比较分析，以及无创诊断标志物的研究：一项初步假设生成研究

《European Journal of Medical Research》：Comparative analysis of subgingival plaque and salivary microbiota in MAFLD patients with periodontitis and study on non-invasive diagnostic markers: a pilot hypothesis-generating study

　　

摘要

背景

代谢相关脂肪性肝病与牙周炎之间存在双向关联，且牙周致病菌在其中起着关键作用。然而，在患有牙周炎的代谢相关脂肪性肝病患者中，龈下菌斑（核心病变部位）与唾液（无创样本）中的微生物群落存在哪些差异及关联仍不清楚。本研究旨在分析这两种微生物栖息地的微生物群落特征，评估唾液在无创监测龈下菌斑中致病菌方面的潜力，并通过功能通路分析探讨这些微生物在代谢相关脂肪性肝病-牙周炎发病机制中的作用。

方法

这项初步的横断面研究纳入了10名代谢相关脂肪性肝病-牙周炎患者，收集了他们的龈下菌斑和唾液样本，通过16S rRNA V3–V4测序比较两种样本中的微生物差异，分析了4种关键致病菌与唾液之间的相关性及其预测价值，还利用PICRUSt2和BugBase工具预测了这些微生物的功能表型。

结果

代谢相关脂肪性肝病-牙周炎患者的龈下菌斑样本与唾液样本在α多样性（香农指数，p=0.02493）和β多样性（PERMANOVA分析，p=0.001）方面存在显著差异，且在门和属水平上，两种样本的微生物组成也存在不同。威尔科克森符号秩检验和线性判别分析表明，龈下菌斑样本中核心牙周致病菌（如牙龈卟啉单胞菌）的含量显著更高，而唾液样本中机会性致病菌（如黑色素普雷沃氏菌）的含量则显著更高。这四种致病菌在唾液中的总绝对丰度与龈下菌斑中的含量呈极强的正相关关系（斯皮尔曼ρ值=1.000）。由于这项初步研究的样本量非常小，这种完美的相关性需谨慎对待，仅可作为初步观察结果，目前还不能得出普遍适用的结论。不过，这四种病原体在唾液中的总绝对丰度对龈下菌斑中相应病原体的含量具有初步的预测价值（受样本量限制，R2值为0.8712）。功能预测显示，龈下菌斑样本在胰岛素抵抗相关通路中的表达显著更高（p=0.00323），而唾液样本则在脂多糖生物合成相关通路中的表达更为突出（p=0.02328）。表型预测结果表明，龈下菌斑样本在“形成生物膜”特性上的表现更为显著（p=0.0491），而唾液样本则在“含有移动元件”以及“兼性厌氧”特性上表现更为明显（对应p值分别为0.01973和0.03084）。

结论

代谢相关脂肪性肝病-牙周炎患者的龈下菌斑与唾液中的微生物群落存在显著差异。这项初步研究定量分析了该类患者龈下菌斑与唾液微生物群的差异特征，提出了这样一个初步假设：唾液中四种核心致病菌的总绝对丰度可能可作为预测龈下菌斑中致病菌负荷的无创指标。同时，通过计算机模拟的功能预测分析，研究了不同口腔微环境中的微生物可能的代谢通路特征及其在代谢相关脂肪性肝病-牙周炎发病机制中的潜在作用。这些发现需要在更大规模且设有适当对照组的研究中得到验证，才能应用于临床。