用人类硬下疳临床标本进行实验性接种后，对苍白密螺旋体相关兔源物质的分子特征分析：一项初步探索性研究

《BMC Microbiology》：Molecular characterization of Treponema pallidum-related rabbit-derived material following experimental inoculation with human chancre-derived clinical specimens: a pilot exploratory study

　　

摘要

背景

梅毒仍然是全球范围内一种主要的性传播疾病。Treponema pallidum亚种< />

在常规实验室培养条件下难以进行研究，这限制了利用临床样本进行的实验和分子研究。这项初步探索性研究旨在通过接种人类硬下疳来源的临床样本，获取与Treponema pallidum相关的兔源材料的初步分子证据。这些来自硬下疳的临床样本首先经过暗视野显微镜检测，随后用于在兔子体内进行实验性睾丸内接种，之后再通过实时聚合酶链反应（PCR）、针对部分16 S核糖体RNA基因片段的常规PCR、Sanger测序以及系统发育分析进行研究。

结果

通过暗视野显微镜，在部分临床样本中观察到了形态上与螺旋体一致的细长结构。初次接种后，三个兔源样本的实时PCR检测出现了与Treponema pallidum相关DNA一致的扩增信号。由于炎症反应较为轻微，这些PCR阳性的兔子随后接受了再次睾丸内接种，所用材料为冷冻保存的硬下疳来源样本，这一做法旨在提高兔源材料的获取率，以便后续的分子分析。再次接种后，这些PCR阳性的兔子在再次接种的（对侧）睾丸出现了类似单侧睾丸炎的炎症变化。常规PCR在PCR阳性样本中产生了预期大小（约1.5 kb）的16 S rRNA基因片段。序列分析显示，这些序列与已公布的Treponema pallidum参考序列高度相似，序列一致性在99.45%到100%之间。系统发育分析表明，这些序列与从GenBank获取的已公布的Treponema pallidum参考序列属于同一类群。

结论

通过结合使用暗视野显微镜、兔子实验性接种、物种特异性实时PCR、测序以及系统发育分析，成功实现了对接种了硬下疳来源临床样本后获得的兔源Treponema pallidum相关材料的初步分子检测及基于部分序列的特征分析。尽管这项研究仍处于探索阶段，且受到阳性样本数量较少以及仅进行了部分16 S核糖体RNA基因分析的限制，但这些结果仍为兔子模型在后续分子研究中的潜在应用提供了初步的分子证据。