RNA 测序分析揭示联合重复经颅磁刺激与压痕针刺激后创伤性脑损伤大鼠的神经免疫重塑及 NTSR1 相关神经活性特征

《Journal of Molecular Neuroscience》：RNA-seq Analysis Reveals Neuroimmune Remodeling and NTSR1-Related Neuroactive Signatures After Combined rTMS and Press-Tack Needle Stimulation in TBI Rats

摘要

创伤性脑损伤（TBI）涉及皮层抑制、神经免疫反应以及神经活性信号改变等复杂的转录紊乱。尽管重复经颅磁刺激（rTMS）和与针灸相关的刺激已被作为脑损伤后的神经调控策略进行研究，但与联合 rTMS 和揿针（PTN）刺激相关的转录组特征仍未被完全理解。在本研究中，对假手术组大鼠、TBI 大鼠以及接受联合 rTMS + PTN 治疗的 TBI 大鼠的前额叶皮层组织进行了 RNA 测序。使用差异表达基因（DEGs）、功能富集、通路 - 基因相互作用网络、蛋白 - 蛋白相互作用网络以及基因集富集分析（GSEA）来探索与 TBI 及联合干预相关的转录改变。TBI 诱导了前额叶皮层显著的转录变化，包括富集在神经活性配体 - 受体相互作用、钙信号传导以及与损伤相关的通路中的基因。联合 rTMS + PTN 刺激与额外的转录重塑相关，特别是涉及免疫炎症通路，如 NF-κB 信号通路、IL-17 信号通路、细胞因子 - 细胞因子受体相互作用以及 Toll 样受体信号通路。交集分析确定了 55 个共享的与 TBI 相关且对干预有反应的基因作为候选特征。进一步的 PPI 和 GSEA 分析表明，Nts/Ntsr1、Egr1、Drd1 及相关神经活性信号分子可能参与 TBI 后对联合刺激的转录反应。这些发现提供了一个基于 RNA-seq 的探索性框架，用于理解 TBI 后与 NTSR1 相关的神经免疫和神经活性分子特征。对选定的神经活性候选基因（包括 Ntsrl、Egrl 和 Drd1）的靶向 qRT-PCR 评估，在一个独立的动物队列中提供了依赖于分组的表达差异的补充证据。需要进一步的蛋白水平和功能验证来确定这些候选分子之间的因果关系。