《The Lancet Infectious Diseases》：Clinical accuracy, performance, and usability of the Dragonfly point-of-care molecular diagnostic platform for mpox: a mixed-methods field evaluation in Uganda
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背景：mpox持续在东非和中非扩散，乌干达为最受影响的国之一。诊断参考标准集中化实时定量PCR（qPCR）需专门基础设施与样本转运物流，导致周转时间长，延误公共卫生响应，尤其在偏远或服务不足地区。床旁分子诊断可弥补此缺陷，但来自受影响地区的前瞻性临床评估数据仍
背景：mpox持续在东非和中非扩散，乌干达为最受影响的国之一。诊断参考标准集中化实时定量PCR（qPCR）需专门基础设施与样本转运物流，导致周转时间长，延误公共卫生响应，尤其在偏远或服务不足地区。床旁分子诊断可弥补此缺陷，但来自受影响地区的前瞻性临床评估数据仍有限。方法：研究人员在乌干达坎帕拉和瓦基索六家卫生机构常规门诊与住院路径中开展前瞻性诊断准确性研究。任何年龄个体若在入组期出现符合WHO疑似mpox定义体征症状且至少有一处可拭取的活动性皮肤病变即连续入组。皮肤病变拭子于床旁用Dragonfly（一种采用双靶设计检测正痘病毒属（OPXV）与猴痘病毒（MPXV）的sample-to-result分子平台）检测，随后行确认性qPCR。主要结局为Dragonfly对MPXV与OPXV相对于qPCR的诊断准确性（敏感性与特异性）。可用性与可接受性通过前线使用者焦点小组评估。临床与流行病学关联在一致参与者中用预设文献驱动二值特征集结合Fisher精确检验与Benjamini–Hochberg校正考察。结果：2025年9月17日至11月28日，300名入组参与者中196名（65%）qPCR MPXV阳性（中位循环阈值21.1[IQR 19.1–23.9]）。确诊MPXV病例中108名（55%）自报男性，88名（45%）女性。主要结局中Dragonfly与qPCR总一致率98.7%（95% CI 96.6–99.5），结果于40分钟内可得。MPXV敏感性98.5%（95.6–99.5），特异性96.2%（90.5–98.5）；OPXV敏感性100%（98.1–100），特异性96.2%（90.6–98.5）。前线使用者报告高可接受性，归因于规避集中实验室物流，同时指出常规使用需培训与供应链保障。解读：Dragonfly在现场广泛病毒载量下对mpox检测具高敏感性与特异性，支持其作为高负担资源有限环境（如中低收入国家、偏远环境或小诊所）床旁诊断的潜力。进一步研究应评估与现有诊断整合、成本效益及跨 clade 与重点人群表现。
研究背景与立项依据
mpox是由猴痘病毒（MPXV，属正痘病毒属OPXV）引起的人畜共患疾病，2022年clade IIb全球扩散触发WHO突发公共卫生事件（PHEIC），2024年clade Ib在刚果民主共和国出现并持续人际传播，再度引发PHEIC。乌干达在2025年初占全球新发病例约35%，为clade Ib高负担国家。现行参考标准集中化实时定量PCR（qPCR）依赖专门基础设施与样本转运，在农村与偏远机构产生多日周转，延误隔离与接触者追踪。床旁分子诊断可将结果压缩至1小时内，但多数新兴等温扩增技术仍依赖实验室设备与训练，且缺乏高负担非洲前线环境的前瞻性临床验证。该研究即在此背景下，于乌干达坎帕拉与瓦基索六家机构开展Dragonfly OPXV/MPXV床旁平台的前瞻性混合方法现场评估，论文发表于《The Lancet Infectious Diseases》。
主要关键技术方法
研究采用前瞻性横断面诊断准确性设计，在六家机构（Kawaala Health Centre III、Naguru Regional Referral Hospital、Nsangi Health Centre III、Kisenyi Health Centre IV、Rear Public Health Laboratory Mbuya、Entebbe Regional Referral Hospital）连续入组300例符合WHO疑似mpox定义且具活动性皮肤病变者。床旁用Dragonfly平台（无电磁珠核酸提取+冻干比色环介导等温扩增lyoLAMP，63.5°C 35分钟，全程<40分钟，目视线粉变黄判读）检测皮损拭子；参比用Mbuya Rear Public Health Laboratory的QIAGEN提取+US CDC MPXV/非天花OPXV实时PCR（cut-off 40周期）。诊断准确性由2×2表估敏感性/特异性/PPV/NPV/一致率；探索性临床-流行病学关联在293例实验室一致者中用预设二值特征+Fisher精确检验+BH校正；可用性用UTAUT2框架对8名前线使用者焦点小组做框架分析。
研究结果
摘要所述主要结局：Dragonfly对MPXV敏感性98.5%（95.6–99.5）、特异性96.2%（90.5–98.5）；对OPXV敏感性100%（98.1–100）、特异性96.2%（90.6–98.5）；总一致率98.7%，<40分钟出结果。
结果与人群特征：300例中qPCR确诊MPXV 196例（65%），中位Ct 21.1（IQR 19.1–23.9），Ct跨度14.5–36.4；确诊者55%男性，职业以商贩（36%）与性工作者（28%）居多，50%报告性暴露。
诊断性能详析：OPXV靶无假阴性（195 TP/101 TN/4 FP），MPXV靶3假阴性（193 TP/100 TN/4 FP），低病毒载量（高Ct）下仍检出；双靶设计中MPXV漏检者均保留OPXV阳性，体现冗余价值。
探索性临床关联：在一致参与者中，淋巴结肿胀（54% vs 17%）、斑丘疹（90% vs 68%）、近期性暴露、黏膜受累、生殖器病变、发热在MPXV阳性中显著富集（BH校正后），肌痛与疲劳无显著关联。
不一致结果表征：3例Dragonfly-MPXV阴/qPCR阳者临床像确诊且OPXV双阳，提示MPXV特异反应漏检而非qPCR假阳；4例Dragonfly阳/qPCR阴者3例双靶阳但无发热/生殖器病变/性暴露，机制未明（可能参考实验室转运降解或Dragonfly假阳）。
定性接受度：前线使用者依UTAUT2七构念（绩效预期、努力预期、社会影响、促成条件、享乐动机、价值、习惯）高度接受，主驱为绩效预期与社会影响；赞赏<40分钟同诊结果与SmartLid提取，但指手动移液易错、依赖市电无备用电池、专进口耗材本地不可得、研究级培训不等同全国推广级。
讨论与结论翻译
讨论指出Dragonfly在现场接近qPCR参考标准，支持其作为高负担资源有限环境床旁确证或潜在首选分子工具；双靶冗余在MPXV特异失效时保留OPXV临床效用；Ag-RDT（55–82%敏感性）与分子平台可阶梯整合（Ag-RDT初筛+Dragonfly确证高疑阴性与免疫低下者）；接受度受同诊结果、eNAT灭活安全、与疟疾RDT习惯类比推动，但推广受供应链、培训、监管（WHO EUL/预认证）、成本效益与地方制造制约；局限含比色判读主观、地理集中、入组需活动皮损（不含早/无症状）、<15岁仅9例、未录HIV状态、discordant数少未做基因组确认。
结论原文浓缩：Dragonfly OPXV/MPXV检测在乌干达现场条件下对mpox具高敏感性与特异性，周转时间兼容同诊决策；支持其在高负担mpox环境阶梯诊断算法中作为确证或潜在首要床旁分子工具评估。后续需前瞻评估实施、地方制造、成本效益及与现有快速诊断基础设施整合，以指导clade Ib应答中的国家政策。
