国外厂家专访:高端RNAi产品杀入中国

【字体: 时间:2005年08月05日 来源:生物通

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人类是很聪明的,当我们要对基因的功能进行研究的时候我们想到了在没有这个基因的时候在细胞或动物有什么不同,那估计就是这个基因的功能。最初,是对基因进行敲除,采用各种对大片段DNA的基因重组方法,把预测的基因ORF区删去。但是后来发现一些必需基因被删除之后细胞或动物直接停止生长或发育,导致死亡,这样使我们难以对基因的功能进行进一步的研究。在1998年,Fire教授(现在真是名副其实的火起来了,目前正在斯坦福大学进行科学研究)发现把双链的短片段RNA导入细胞内会使目的基因沉默,这种沉默的效率比以往用反义RNA进行沉默的效果更好。此文章在Nature上发表后引起了业内的轰动,因为这个技术对研究基因功能实在太有用了。
从1998年发展至今,从当初的合成siRNA文库到现在的shRNA文库,RNAi技术已经改进了许多。Ambion、Promega、Invitrogen、Stratagene、Sigma-Aldrich各大公司都看到了这种技术的含金量,纷纷加入到这个战场中来,各大厂家各出奇谋,一时之间刀光剑影、硝烟弥漫。这场斗争可谓遍布世界各地,而中国作为一个近年发展得最让人惊讶的国家,各个厂家的目标也开始瞄向了这里。
最近RNAi朝着高通量趋势发展了,RNAi的大批量操作大大促进了诊断和治疗方法的进步,同时也使基因功能组的研究成为可能。与此同时还有许多科学家将RNAi应用于疾病的治疗中,这其中比较突出的就是Alnylam生物制药公司,它拥有先进的RNAi治疗技术,与它合作进行RNAi治疗研究的客户包括有Ambion、Invitrogen、Sigma-Aldrich等。以上这些前沿的科技对于国内的用户来说可能还是有点遥远,但是作为一种发展趋势一些国外RNAi厂家势必要一步步地闯进中国市场来。
就目前提供的RNAi产品来说都专注于进行科学研究的,为了更多了解这些厂家到底有什么样的RNAi产品以及他们对在中国发展的想法,生物通的小编通过网络越洋采访了在这方面表色出色的Ambion、OriGene和OpenBiosystem公司的相关负责人。这三家公司在国内的发展可谓代表了三个阶段:一,已经有一定知名度,产品有一定的市场,已经初步进入阶段(Ambion);二,已经有合作伙伴,但产品仍需推广,正在逐步进入阶段(OriGene);三,尚未有合作伙伴,在观望阶段(OpenBiosystem)。

Ambion公司成立于1988年,从1989年开始在美国德克萨斯州的奥斯丁市开始运营。公司在剑桥和日本都设有分支机构。Ambion本身称为RNA公司自有其道理,自成立以来它所有产品都围绕RNA的。大家都知道RNA比起DNA可矜贵多了,每个步骤都得小心翼翼,溶液也需要特殊处理。而Ambion提供的产品都是高质量的无RNA酶的产品。在RNAi这方面,他们从2001年开始提供相关产品,是最早提供RNAi产品公司之一。最近它又率先推出了为研究miRNA而设计的新产品,关于miRNA和siRNA你若是有任何困惑,可以看我们聚焦的文章:走进microRNA的大世界
目前Ambion公司提供六种RNAi产品,它们分别是:化学合成、利用试剂盒转录获得、利用RNA酶将长片段双链RNA切割获得、利用质粒表达shRNA、利用PCR产物表达shRNA和从病毒载体表达shRNA。除了siRNA外,公司还提供将100个到1000个siRNA导入细胞的转染和电穿孔产品。



Ambion的siPORTer 96孔电穿孔仪和板


Ambion的学术总监Ellen Prediger博士表示:“Ambion的宗旨是让更多的人使用到RNAi技术,我们认为在环太平洋地区国家的分子生物学研究都将有很大的发展,这其中以中国的发展最为引人注目。我们对中国的分子生物学产品市场抱有很大的希望。因此加强我们与中国科研人员的联系就变得非常重要。要让更多的中国用户了解,我们的产品可以如何帮助他们进行科学研究。”
在2004年的夏天,Ambion还派出了研发部门的高级科学家参加在北京召开的第十届全球华人生物科学家大会。Ambion的专家在会上做出了RNAi工作的讲座,并且之后在国内多个地点做了技术讲座。Ambion为了进一步开发中国市场,会在这里投入更多的资源。目前Ambion在中国也已经有代理商。
对于以后RNAi市场的发展Ellen Prediger博士也进行了预测。化学合成siRNA随着越来越多的公司加入竞争的行列估计价格会越来越亲民,随着设计技术的成熟,公司也可以提供越来越独特和有效的siRNA产品。现在提供的病毒载体为基础的shRNA又克服siRNA作用时间短、导入细胞困难等缺点。目前只有2/3的人类基因是知道功能的,还有许多空白等待我们去研究,而siRNA产品以其价格低廉、沉默效率高、作用独特优点等当然成为我们的首选。

OriGene公司成立于1997年,它的拳头产品就是最大的商业化的以表达载体形式构建的人类全长cDNA文库。从去年开始OriGene公司开始利用他们现有的cDNA克隆构建shRNA文库。OriGene公司的首席执行官何博士是一个中国人,他来自中国无锡,所以无形中对OriGene产品又多了几份亲切感。由于何博士正在国外进行商务活动,OriGene商务发展部门的主管Rich Hamer博士代之进行采访。
Rich Hamer博士认为:“RNAi未来潜在的市场是十分巨大的,我们的FlagArray文库产品为我们构建shRNA文库打下了坚实的基础。并且我们的的RNAi产品带有抗性标签,可以保证稳定的插入。对于合成siRNA来说,它的扩增是完全免费的,只需一次定购,以后无需另外付费。”
OriGene公司坚定地相信对于生物学研究试剂公司来说中国市场是发展极为迅速的市场之一。他们正在寻找机会进入中国市场,目前他们在中国已经有代理商。但是鉴于中国市场太大了,存在一定的复杂性和多变性,Rich Hamer博士认为不能用单一的方法在这个市场进行发展。
对于这一点,笔者有一点点体会,许多外国人在尝试进入中国市场的时候都或多或少的感到困惑。虽然国外也有所谓的relationship(呵呵,有人的地方难免讲人情、关系嘛),但是中国的这个问题会比较突出一点。国内的销售情况有时也会有点乱,一级代理、二级代理的下来,所以啊,加入WTO后很可能有厂家希望能从代理商手中把权力慢慢收回来。题外话了。

OpenBiosystem对于国内的用户应该是个完全陌生的名字。它已经提供RNAi产品三年了,他们产品包括果蝇和线虫的全基因组RNAi文库。两年前开始提供克隆就绪(pre-cloned)的哺乳动物RNAi文库。目前他们提供覆盖人类和小鼠全基因组的文库产品,在预计在今年年底大鼠的产品可以面世。
OpenBiosystem公司的哺乳动物文库产品的短发夹结构加入了一个30bp来源于miRNA的片段,这使得沉默效率提高了12倍。OpenBiosystem的Troy Moore博士认为正是他们不断发展的技术使他们保持着业内领先的水平,同时他也表示他们一直在寻找机会进入中国市场,现在需要的是一个Mr. Right。

RANi技术不需昂贵的仪器,操作相对也简便,siRNA或者shRNA的成本也随着生产厂家的增加有下降的趋势,基于以上几点这项技术在中国实在是有诱人的前景。看完这几家公司的一些产品你是否心动了呢?在未来金黄的秋季,生物通将推出RNAi技术专栏。大家对这个技术都了解多少,想知道哪方面的内容,都遇到了什么问题,欢迎大家email。注明自己的实验室,说不定会有意外惊喜哦(生物通记者 谢菲)。


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