生物通报道：Gene Tools公司最新文章描述了一种利用吗啉寡聚核苷酸（Morpholino oligonucleotides，MF）进行miRNA活性敲除、成熟敲除和特异控制的新技术。

microRNA调节基因特别是一大组基因的表达，在胚胎发育、心脏功能、癌症发生等过程中扮演重要角色。miRNA研究的最新发现改变了我们对基因调节的认识，出现了许多miRNA活性的新报道。miRNA活性的实验操作已经成为分子生物学的一种标准工具，但这些技术目前仍处于改进中。

microRNA的成熟过程分为几个阶段。初级miRNA(primary microRNA)转录自DNA，并折叠为一个stem-loop。酶Drosha将stem-loop与转录本(transcript)其它部份分开，接着酶Dicer将loop与stem分开。双链stem与蛋白Argonaute相互作用，Argonaute将双链劈开，释放其中的一条链，与剩下的一条链（guide strand，引导链）形成miRISC复合体。miRISC复合体与mRNA相互作用，改变mRNA的表达。

miRNA的活性敲除通常利用靶向miRNA引导链的寡核苷酸。靶向miRNA的Morpholino oligonucleotides也能干扰miRNA的活性。单独利用这种技术很难控制敲除的特异性。然而，靶向未成熟miRNA的溶核加工位点（nucleolytic processing sites，生物通编者译）的Morpholino，能够抑制miRNA的成熟。如此，靶向初级miRNA的成套的不重叠的Morpholino oligos，可以用于特异控制；如果靶向同一个miRNA的两个不重叠的oligo引发的表型相同，就能说明表型是由于靶miRNA的活性被敲除引起的，而非脱靶效应。这种技术的详细内容刊登于：
Kloosterman WP, Lagendijk AK, Ketting RF, Moulton JD, Plasterk RHA. Targeted inhibition of miRNA maturation with morpholinos reveals a role for miR-375 in pancreatic islet development. PLoS Biol. 2007;5(8): e203.

biology.plosjournals.org/perlserv/?request=get-pdf&file=10.1371_journal.pbio.0050203-L.pdf
已刊载电子版。

GENE TOOLS公司成立于1997年，位于AVI Biopharma公司旗下，是一家生产生物学和医学研究所需的序列个性化的Morpholino oligos的生物技术公司。其Morpholino产品从2000年开始商业化，目前已经有1700篇研究型论文涉及到Morpholino。

GENE TOOLS的初级产品Morpholino反义核苷酸，是合成分子，阻断特定基因活性的Morpholino。Morpholino的亚单位的连接顺序决定了受其阻断的目的基因。GENE TOOLS公司根据客户需要，设计关闭目的基因活性的个性化Morpholino。GENE TOOLS公司通常每周能够合成200多个Morpholino。

GENE TOOLS的客户一般是大学、研究所和制药公司的研究人员。
发育生物学家通过将Morpholino oligos注入卵子或者斑马鱼、青蛙、海鞘、海胆等的受精卵中研究胚胎发育

细胞生物学家利用Morpholino oligos研究新经过测序的基因的功能

医疗工作者利用Morpholino oligos研究癌症等疾病的细胞学机制

想获得关于Morpholino oligos的更多信息，请登陆GENE TOOLS网站（www.gene-tools.com）并阅览文章（en.wikipedia.org/wiki/Morpholino）
                                                                (生物通 小粥)

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miRNA简介：microRNA（miRNA,微RNA）即为长度为22nt左右的5′端带磷酸基团、3′端带羟基的非蛋白编码的调控小RNA家族。
miRNA对生长发育进行更为重要的调控作用。同时，科学家们也发现人类基因组中大约有255个编码miRNA基因，约占人类基因数的1%，但尚不清楚其功能。最近科学家发现小RNA 与‘epigenetic’现象有联系。所谓epigenetic 是指并不涉及遗传序列的特征性的遗传改变。有人已试图将小RNA 用于抗病毒治疗之用,认为它们有可能抑制HIV21 和灰质类病毒丙型肝炎病毒的转录,以及也可能用于肿瘤的治疗。

miRNA与siRNA之间有许多相同之处：
1.二者的长度都约在22nt左右。
2.二者都依赖Dicer酶的加工，是Dicer的产物，所以具有Dicer产物的特点。
3.二者生成都需要Argonaute家族蛋白存在。
4.二者都是RISC组分，所以其功能界限变得不清晰，如二者在介导沉默机制上有重叠。5.miRNA和siRNA合成都是由双链的RNA或RNA前体形成的。

miRNA与siRNA的不同点：
1.根本区别是miRNA是内源的，是生物体的固有因素；而siRNA是人工体外合成的，通过转染进入人体内，是RNA干涉的中间产物。
2.结构上，miRNA是单链RNA，而siRNA是双链RNA。
3.Dicer酶对二者的加工过程不同，miRNA是不对称加工，miRNA仅是剪切pre-miRNA的一个侧臂，其他部分降解；而siRNA对称地来源于双链RNA的前体的两侧臂。
4.在作用位置上，miRNA主要作用于靶标基因3′-UTR区，而siRNA可作用于mRNA的任何部位。
5.在作用方式上，miRNA可抑制靶标基因的翻译，也可以导致靶标基因降解，即在转录水平后和翻译水平起作用，而siRNA只能导致靶标基因的降解，即为转录水平后调控。
6.miRNA主要在发育过程中起作用，调节内源基因表达，而siRNA不参与生物生长，是RNAi的产物，原始作用是抑制转座子活性和病毒感染。