利用Bio-Plex悬液芯片进行细胞因子研究[创新技巧]

哺乳动物细胞一般利用内质网/高尔基体来输出大部分蛋白。然而，有些蛋白是通过非传统的机理输出的。其中就包括促炎症细胞因子Pro-IL-1β，它需要caspase-1的切割才具有生物活性，随后释放。某些细胞类型，如巨噬细胞和角质形成细胞，在应对压力时会分泌IL-1β。例如，在紫外照射时，角质形成细胞会激活caspase-1，并诱导IL-1β的分泌。瑞士苏黎世理工学院细胞生物学研究院的研究人员通过分析，表明活性caspase-1能调节角质形成细胞和其他细胞中的非传统蛋白分泌。

在这项研究中，研究人员开发出一种基于RNAi的新方法来分析caspase-1依赖的各种细胞因子的释放。他们利用Bio-Plex人细胞因子27重芯片来测定IL-1β以及其余26种细胞因子，其中21种含有信号肽。这将有助于他们了解caspase-1是否特异性地靶定非传统的蛋白分泌物或全部分泌物。

结果表明测定上清和细胞裂解液中的细胞因子浓度非常重要，因为它有助于计算分泌物的比例，从而说明蛋白表达的变化。研究人员证实在角质形成细胞中，caspase-1只影响非传统的蛋白分泌，而不影响总体的蛋白表达。

研究人员认为他们的方法适用于几乎所有细胞类型以及组织培养物。siRNA、特异的抑制剂和干扰的细胞能用于研究基因或胞内进程对蛋白分泌的影响。

研究人员还认为多重细胞因子悬液芯片技术是一个非常强大的工具，能在某种条件下鉴定细胞分泌的细胞因子。此方法的最主要优势是能在同一个实验中定量测定多种细胞因子。

此技术札记（Technical note 5762）可以从Bio-Rad的网站上获得，地址为http://www.bio-rad.com/bio-plexassays。它的标题为Measurement of Caspase-1 Dependent Cytokine Secretion Using the Bio-Plex Human Cytokine 27-Plex Panel。

关于Bio-Rad
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（生物通 余亮）