新技术快速检测甲流区分普通感冒

　　

生物通报道，2009年本世纪的第一场流感横扫全球，甲流H1N1实实在在地发生在每个人的身边，可是它的面目却又是如此的陌生，人们很难区分甲流H1N1与季节性流感，究竟如何区分普通感染与甲流成为一个问题。

 

对公众而言，迫切需要一种新的检测技术可以快速而准确地确认甲流病毒感染者。

 

目前，用于区分甲流H1N1与其他类型流感的最佳技术是real-time RT-PCR，它具有特异性与高度的准确性，然而，遗憾的是，这个反应需要的时间比其他甲流检测方式要长，尽管，其他的甲流检测方法使用的时间较短，但是准确率却不高。

 

来自威斯康辛医学院的Kelly J. Henrickson博士带领的研究小组开发出一种改良的real-time RT-PCR，可缩短甲流的检测时间的同时保证高的准确率。他们开发的这种全自动的多能RT-PCR可区别A型流感、B型流感和呼吸道合胞病毒（RSV）。同时还能区分猪源性H1N1、H3N2和人源性H1N1（季节性流感）。

 

这种检测技术的另一特点是，一次可检测大量的样本，并且在短时间内完成样本分析。

 

据Beck介绍，这种RT-PCR方法具有特异性高、准确率高、时间短三个特征，十分适合临床和公共卫生检查使用。

 

这些研究经费来自Midwest Respiratory Virus Program Clinical Laboratory。

（生物通 小茜）

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Rapid Flu Testing Differentiates Strains of Influenza

 

real-time RT-PCR

Real-time RT-PCR中文译作“实时逆转录聚合酶链反应”，是一种最新发展的定量PCR技术。该技术借助于荧光信号来检测PCR产物，一方面提高了灵敏度，另一方面还可以做到PCR每循环一次就收集一个数据，建立实时扩增曲线，准确地确定CT值，从而根据CT值确定起始DNA拷贝数，做到了真正意义上的DNA定量，较以往常用的终点定量的方法更加准确。根据所使用的技术不同，荧光定量PCR又可以分为TaqMan探针和SYBR Green I荧光染料两种方法。Real-time PCR所采用的专用PCR仪能够自动在每个循环的特定阶段对反应体系的荧光强度进行检测，实时的记录荧光强度的改变，从而对样品的浓度进行精确的定量。

 

RT-PCR是Reverse transcription PCR的简称，中文译作“”，是将RNA的反转录（RT）和cDNA的聚合酶链式扩增（PCR）相结合的技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA，再以cDNA为模板，扩增合成目的片段。RT-PCR技术灵敏而且用途广泛，可用于检测细胞中基因表达水平，细胞中RNA病毒的含量和直接克隆特定基因的cDNA序列。作为模板的RNA可以是总RNA、mRNA或体外转录的RNA产物。无论使用何种RNA，关键是确保RNA中无RNA酶和基因组DNA的污染。用于反转录的引物可视实验的具体情况选择随机引物、Oligo dT 及基因特异性引物中的一种。对于短的不具有发卡结构的真核细胞mRNA，三种都可。