纳升级分液利器—mosquito®自动液体工作站[新品推荐]

【字体: 时间:2009年05月20日 来源:TTP

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  mosquito®是一种小体积液体处理仪器,它将低成本的一次性加样针头系统和容积式替换移液方式相结合,来确保零交叉污染。它能够移取上至1.2 µL、下至 50 nL的体积,而不需要清洗针头。为了评估mosquito液体处理器的准确性和精确度,本文使用Artel MVS来验证了湿式和干式分液中mosquito移取一系列不同目标体积的水溶液和DMSO溶液时的精确度和准确性。

对于许多高通量筛选(HTS)部门来说,运行通量最大化和分析可靠性愈渐取决于一个关键因素:分析即用型板。这类分析即用型板通常已经包含了预先从储存库中以特定浓度制备好的待测。DMSO是常见的溶解化合物的试剂,但DMSO的浓度一旦高于1%,就会显著影响分析结果。因此,在制备分析即用型板时,要求准确地移取纳升级含DMSO的样品储存液,让DMSO保持低浓度。微升级以下的液体操作在技术上具有一定的挑战性,传统方法难以精确地确认低至几十个纳升的量取。

mosquito®是一种小体积液体处理仪器,它将低成本的一次性加样针头系统和容积式替换移液方式相结合,来确保零交叉污染。它在X、Y和Z轴的定位精确性优于0.05mm。mosquito能够移取上至1.2 µL、下至 50 nL的体积,而不需要清洗针头。


这些特征,让mosquito在将纳升级的化合物溶液从存储库中转移到分析板上这种复杂转移操作时,拥有无比的准确性和可重复性。从而让这一在蛋白结晶领域已享有盛誉的纳升级液体处理工作站,越来越多地在各大跨国药厂和CRO的研发部得到应用,在配制分析即用型板时进行纳升级液体分配。

为了评估mosquito液体处理器的准确性和精确度,本文使用Artel MVS来验证了湿式和干式分液中mosquito移取一系列不同目标体积的水溶液和DMSO溶液时的精确度和准确性。

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操作
为了研究mosquito分液的精确性和准确性,本实验利用mosquito分别将MVS水溶液样品和含DMSO的MVS样品溶液分配至384孔板中;其中含DMSO的样品溶液是通过混合MVS储存(染料)液和DMSO溶剂来制备的。随后利用独立的分液器将MVS稀释液或缓冲液分配到孔中。通过MVS测量吸光值来计算每个孔的体积值。

Artel MVS®
Artel MVS能在几分钟之内可靠地验证自动化液体处理器的准确性和精确度。MVS所采用的双染料比例式光度测定利用了两种有着不同吸收峰的染料,它们分别为520 nm(红色)和730 nm(蓝色)。六种包含不同浓度红色染料的样品溶液,用于检测仪器在将10 nL-350 µL的全部体积范围的液体分配到96孔和384孔板时的性能。蓝色染料的浓度在全部体积范围内所有样品溶液中都是恒定的,如同稀释缓冲液的浓度一样。因此蓝色染料作为内标,来计算每孔的溶液深度。

自动化液体处理器分配样品溶液,并稀释到微滴定板的孔中,然后分别在双波长下测量每孔的吸光度。MVS应用比尔-朗伯定律,利用吸光值来自动计算液体处理工作站的每个移液通道所分配体积的精确度和准确性。

水溶液的准确性和精确度结果
在为优化加样性能所采取的调整很少的情况下,利用MVS对mosquito分配含DMSO溶液样品和水溶液样品的准确性和精确度性能进行了测定。精确度结果与mosquito公布的性能参数进行比较。

图3显示了mosquito在分别将水溶液和DMSO溶液分配至干燥的384孔板时所测量得到的精确度性能。对于DMSO,每次体积转移都使用了单独的加样针。对于水溶液,对于特定加样体积的重复分液,加样针是重复使用的;仅在加样体积改变时才更换加样针。收集的数据显示了精确度性能在DMSO和水状样品溶液中都具有极佳的可比性。mosquito在所测定的各种特定体积下移液,在大多数情况下,精确度性能比厂家公布的参数还要好得多。

图4显示了MVS所测量得到的mosquito的准确性。在进行水溶液和DMSO样品溶液的分液时,mosquito分液的误差都低于5%。在液体处理器中设定补偿能实现两种样品类型加样准确性结果的一致(未显示)。


水溶液移液的加样针间差异
在此次性能评估中,水溶液的分配是通过一组16个单独的加样针、6次重复的分液(不更换加样针)来进行的。每次分配时加样针之间的差异是通过计算MVS所测得的每个加样针体积的标准偏差来测定的。图5显示,尽管mosquito加样针是一次性的,但加样针的性能在多次使用后几乎没有改变。此次展示的数据仅限于同一个加样针的6次重复。


线性
收集的数据显示在分配DMSO溶液和水溶液样品溶液时,实际的分配体积与预期体积之间的相关性水平高,从而证明了mosquito在分配溶剂时的一致性能(图6)。


结论

  1. 测量结果表明:无论是水溶液和含DMSO的样品,mosquito在各种不同体积液体的分配中均表现出了比自身标注特性更出色的性能。
  2. MVS能很快且方便地检测mosquito的准确性和精确度,只需大约一天的时间即可收集全所有提交的数据。
  3. 尽管制造厂商并没有特别强调mosquito的准确性(accuracy),但经MVS性能检测结果表明在分配检测体积范围内的水性和含DMSO样品时,无需调整和校正,误差也小于5%。
  4. mosquito能可靠地分配不同的液体类型,且有着相同的精确性能。
  5. mosquito的加样针能使用多次,也不会带来加样结果的差异。

mosquito®仪器特性

  • 零交叉污染
  • 移液体积范围从50nL到1200nL
  • 几乎可忽略不计的死体积,减少样品损耗
  • 满足96、384和1536孔板格式
  • 移液体积为50nL时差异系数(CVs)<8%, 100nL时CVs < 4%
  • 准确性:整体在±5%之内
  • 可与其他自动化机器人轻松整合

表1. mosquito®仪器的性能参数

 

Mosquito

工作范围

25nL-1200nL,以1nL递增

分液方式

活塞控制的容积替换式加样针的移液方式

准确性

50nL<8%,在100nL<4%

板类型

任何符合SBS标准板,48963841536孔格式

板格式转换

一个操作流程可从96孔板转换到孔板384,从96孔板到1536孔板或从384孔板到1536孔板

速度

系统具多功能性,可同步进行板复制(板对板3.5分钟)和板内连续稀释,节约了时间

适用液体

容积式移液管能够吸取/或者分配多种不同粘度的液体,如乙醇、水、DMSO、甘油和聚乙二醇等

死体积

可忽略不计-常规操作需要大约10nL的过量吸取

洗涤时间

不需要,因为使用一次性的移液加样针头

去离子步骤

不需要

使用方便性

简单、用户友好的界面,支持多用户环境

维护方便性

仅需最少的维护。取决于使用程度,推荐每使用36000个加样针头后花费10分钟重新校准

整合

mosquito能轻而易举地与广泛各式的机械移板机和液体处理工作站整合,操作者无需值守

TTP LabTech Ltd.是全球知名的专业实验室仪器厂商,公司的创新型产品mosquito®纳升级液体处理设备、Acumen®高内涵高通量筛选设备和comPOUND®模块化样品管理和储存系统在全球工业界和学术界均有极高的市场占有率,声誉卓越。
 
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